戊四氮致癇幼鼠不同腦區(qū)和血清S100B蛋白、MBP的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：
　　 研究S100B蛋白、髓鞘堿性蛋白(MBP)在戊四氮(PTZ)致癇幼鼠癲癇后不同腦區(qū)和血清的變化，以探討癲癇發(fā)作后腦組織的損傷情況。
　　 方法：
　　 清潔近交系SD雄性4-5周齡幼鼠60只，隨機(jī)分為對(duì)照組(A組，n=10)及實(shí)驗(yàn)組(n=50)。實(shí)驗(yàn)組腹腔注射PTZ，劑量為50mg/Kg，A組注射等量生理鹽水。根據(jù)癲癇發(fā)作分級(jí)，Ⅰ級(jí)視為B組(n=9)，該組立即取腦；Ⅱ級(jí)以上發(fā)作50只，隨機(jī)抽取于癲癇

2、發(fā)作后0小時(shí)(C組，n=10)、6小時(shí)(D組，n-10)、24小時(shí)(E組，n=10)、72小時(shí)(F組，n=10)斷頭。各組隨機(jī)抽取2只分離海馬，進(jìn)行免疫組化觀察。取軀干血后分別取海馬、額葉皮層和中腦。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定各腦區(qū)及血清S100B蛋白和MBP含量；以Envision二步法免疫組織化學(xué)染色，觀察各組大鼠海馬S100B蛋白、MBP的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1、戊四氮腹腔注射幼鼠造模成功，幼鼠出

3、現(xiàn)異常行為學(xué)改變；
　　 2、幼鼠致癇后各腦區(qū)和血清S100B蛋白呈一個(gè)動(dòng)態(tài)升高的過(guò)程；海馬、額葉和血清S100B蛋白皆于癲癇后6小時(shí)升高，24小時(shí)達(dá)高峰，與對(duì)照組相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別P＜0.05或P＜0.001)，72小時(shí)下降至對(duì)照組水平；中腦S100B蛋白在癲癇后24小時(shí)升高，與對(duì)照組相比有非常顯著性差異(P＜0.001)，72小時(shí)下降至對(duì)照組水平，提示海馬、額葉神經(jīng)損傷在前，中腦神經(jīng)損傷在后；B組、C組各腦區(qū)及血

4、清S100B蛋白與對(duì)照相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；
　　 3、幼鼠致癇后各腦區(qū)和血清MBP呈一個(gè)動(dòng)態(tài)升高的過(guò)程；海馬、額葉和血清MBP皆于致癇后24小時(shí)升高，72小時(shí)達(dá)高峰，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別P＜0.05或P＜0.001)，中腦MBP在致癇后72小時(shí)顯著升高，與對(duì)照組相比有非常顯著性差異(P＜0.001)，同樣提示海馬、額葉神經(jīng)損傷在前，中腦神經(jīng)損傷在后；B組、C組、D組各腦區(qū)及血清MBP與對(duì)照相比均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

5、P＞0.05)；
　　 4、海馬S100B蛋白顯著皆高于血清，兩者呈正相關(guān)，r=0.88，P＜0.05；海馬MBP顯著皆高于血清，兩者呈正相關(guān)，r=0.82，P＜0.05；
　　 5、免疫組織化學(xué)染色顯示實(shí)驗(yàn)組海馬組織S100B蛋白于致癇后6小時(shí)表達(dá)增加，24小時(shí)達(dá)高峰；
　　 6、免疫組織化學(xué)染色顯示實(shí)驗(yàn)組海馬組織MBP于致癇后24小時(shí)表達(dá)增加，72小時(shí)達(dá)高峰。
　　 結(jié)論：
　　 1、戊四氮致

6、癇模型是一個(gè)較理想的全面強(qiáng)直-陣攣發(fā)作模型；
　　 2、幼鼠致癇后海馬、額葉、中腦及血清S100B蛋白明顯升高，表明癲癇發(fā)作可造成大腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的損傷；
　　 3、幼鼠致癇后海馬、額葉、中腦及血清MBP明顯升高，表明癲癇發(fā)作可造成中樞神經(jīng)髓鞘的損傷；
　　 4、幼鼠致癇后免疫組織化學(xué)顯示海馬S100B蛋白、MBP表達(dá)明顯增加，進(jìn)一步證實(shí)了癲癇可造成大腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)髓鞘的損傷：
　　 5、幼鼠致癇后