培哚普利對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠心肌肥厚中FGF-2的影響.pdf

1、背景與目的：
　　心肌肥厚是多種心血管疾病早期的病理改變之一，分為病理性和生理性，病理性心肌肥厚表現(xiàn)為心肌纖維增生，心肌細(xì)胞排列紊亂，繼續(xù)發(fā)展可引起心室重構(gòu)、心力衰竭，并可能導(dǎo)致惡性心律失常、急性心肌梗死或心源性猝死等高危疾病是心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，因此心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展機(jī)制一直是心血管方面的研究熱點(diǎn)。
　　成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子是一組多肽形成纖維細(xì)胞的有絲分裂原，具有促進(jìn)血管、骨形成和損傷修復(fù)的功能，其中FGF-1(fib

2、roblast growth factor-1，F(xiàn)GF-1)和FGF-2(fibroblast growth factor-2，F(xiàn)GF-2)最早被發(fā)現(xiàn)，同時(shí)因電泳時(shí)等電點(diǎn)分別呈現(xiàn)酸性和堿性又被稱為酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(acidic fibroblast growth factor，aFGF、FGF-1)和堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor，bFGF、FGF-2)。國外研究示FGF-2與

3、心肌細(xì)胞表達(dá)的功能性受體(Fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR)結(jié)合，誘導(dǎo)酪氨酸磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展。
　　成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(fibroblast growth factor，F(xiàn)GF-2)是成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子家族中的一員，國外研究表明FGF-2在慢性腎臟衰竭的心肌肥厚組織中表達(dá)明顯升高，提示FGF-2與心肌肥厚病理改變有關(guān)。
　　研究證明RAAS系統(tǒng)與心肌肥厚病

4、理改變有關(guān)。RAAS系統(tǒng)即腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)，血管緊張素原經(jīng)過腎素的作用可轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅰ，而血管緊張素Ⅰ在血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的作用下形成血管緊張素Ⅱ，隨后與血管緊張素受體結(jié)合，引起多種生理作用，例如使全身微動(dòng)脈收縮，醛固酮分泌增加等，從而導(dǎo)致心肌重構(gòu)等一系列病理改變。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(angiotensin converting enzyme inhibitors，ACEI)類藥物可以阻止血管緊張素Ⅰ向血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化

5、，使血管緊張素Ⅱ生成減少，阻止心肌重構(gòu)發(fā)生發(fā)展。
　　本研究通過制作異丙腎上腺素性大鼠心肌肥厚模型，了解大鼠心肌肥厚細(xì)胞中FGF-2活性變化，探討在心肌肥厚傳導(dǎo)通路中FGF-2的作用及發(fā)生機(jī)制，以及培哚普利對(duì)FGF-2表達(dá)的影響，為以后臨床制定藥物治療方案提供理論依據(jù)。
　　方法：
　　隨機(jī)將30只健康雄性SD大鼠分為對(duì)照組、模型組及藥物干預(yù)組，每組10只。模型組和藥物干預(yù)組大鼠皮下注射異丙腎上腺素(isoproter

6、enol，ISO)3mg/(kg·d)制作心肌肥厚模型，對(duì)照組大鼠皮下注射等劑量的蒸餾水。藥物干預(yù)組大鼠應(yīng)用培哚普利1mg/(kg·d)溶于2ml蒸餾水中灌胃，對(duì)照組和模型組大鼠應(yīng)用等劑量生理鹽水灌胃，連續(xù)飼養(yǎng)10d。10天后將3組大鼠分別測(cè)量體重、心臟質(zhì)量及左心室質(zhì)量，計(jì)算心臟及左心室質(zhì)量指數(shù)，分別取3組大鼠左心室心肌組織行HE染色，觀察左心室心肌形態(tài)及排列，應(yīng)用免疫組化方法觀察心肌組織中FGF-2的表達(dá)，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-R

7、CR)檢測(cè)心肌細(xì)胞中FGF-2的mRNA含量。
　　結(jié)果：
　　1、心臟質(zhì)量指數(shù)和左心室質(zhì)量指數(shù)
　?、傩呐K質(zhì)量指數(shù)(HM/BM):對(duì)照組＜藥物干預(yù)組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（1.93±0.11mg/g vs 2.71±0.34mg/g vs 3.79±0.11mg/g，均P＜0.05）。
　?、谧笮氖屹|(zhì)量指數(shù)(LVM/BM):對(duì)照組＜藥物干預(yù)組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（1.46±0.11mg/g v

8、s 1.96±0.12mg/g vs 2.49±0.07mg/g，均P＜0.05）。
　　2、蘇木精—伊紅(hematoxylin-eosinstaining，HE)染色
　　對(duì)照組心肌細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清楚，未見形態(tài)異常;模型組心肌細(xì)胞肥大，且排列不規(guī)則，細(xì)胞結(jié)構(gòu)模糊，細(xì)胞間質(zhì)伴有大量心肌纖維增生;藥物干預(yù)組心肌細(xì)胞的病理改變程度重于對(duì)照組，但輕于模型組。
　　3、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
　　RT-

9、PCR檢測(cè)3組大鼠左心室心肌肥厚組織中FGF-2mRNA含量比較:模型組＞藥物干預(yù)組＞對(duì)照組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.39±0.07 vs 0.63±0.12vs0.73±0.12，均P＜0.05)。
　　4、免疫組化方法
　　免疫組化染色后FGF-2在心肌細(xì)胞中呈棕色顆粒，正常組織中心肌細(xì)胞胞漿中可見少量深棕色顆粒，呈微弱陽性表達(dá);模型組中心肌細(xì)胞胞漿內(nèi)可見大量棕色顆粒，呈強(qiáng)陽性表達(dá);干預(yù)組中可見棕黃色顆粒，呈陽性表達(dá)，

10、較模型組少。組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組大鼠心肌組織中FGF-2陽性區(qū)平均積分光密度比較:對(duì)照組＜藥物干預(yù)組＜模型組，組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(79.41±7.85 vs 127.11±13.04 vs 141.07±9.39，均P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.心肌肥厚組織中FGF-2表達(dá)升高，提示FGF-2可促進(jìn)異丙腎上腺素所致大鼠心肌肥厚的發(fā)生發(fā)展。
　　2.培哚普利干預(yù)組大鼠心肌組織中FGF-2的表達(dá)明顯低于模型