Gli2和FoxM1在肝癌中的表達及其與臨床預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　肝癌是人類最常見的惡性腫瘤之一,在全球惡性腫瘤發(fā)病率中排第五位,死亡率排第二位,每年約有69萬患者死于肝癌[1]。肝癌分類中以肝細胞癌占絕大多數(shù),導(dǎo)致原發(fā)性肝癌發(fā)生的原因主要包括病毒性、酒精性肝炎及肝硬化、黃曲霉素等,而在我國以慢性肝炎(主要是乙肝和丙肝)為主要病因。目前,肝癌的根治仍是以手術(shù)切除為主,并輔以其他的治療方法,如介入治療、化療、放療及分子靶向治療。因肝癌早期臨床癥狀不典型,就診時多處于終末期,且肝癌細

2、胞還具有對放化療不敏感且術(shù)后易復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的特點,故造成肝癌患者總生存期較短。然而對于肝癌的復(fù)發(fā)、侵襲轉(zhuǎn)移的機制目前研究還不是十分明確,且缺乏有效的預(yù)測肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的分子指標。
　　Hedgehog信號通路在細胞生長、胚胎形成及維持成人組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定方面扮演重要的作用。同時更多研究表明Hedgehog信號參與多種腫瘤的形成及發(fā)展,如基底細胞癌、消化道腫瘤、卵巢癌等。Gli作為Hedgehog信號通路的關(guān)鍵核轉(zhuǎn)錄因子,有研究報道 Gl

3、i2在肝癌中存在過表達并且與肝癌術(shù)后的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系。FoxM1為Fox轉(zhuǎn)錄因子家族中的一種,其涉及細胞的多種生物過程,如細胞分化、遷移、侵襲、DNA損傷修復(fù)、組織內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、血管形成、炎癥反應(yīng)等。因此,探索Gli2及FoxM1在肝癌發(fā)生、發(fā)展及術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的過程中所發(fā)揮的作用具有重要意義。
　　研究目的：
　　1.研究Hedgehog信號通路關(guān)鍵分子Gli2及FoxM1在肝細胞癌中的表達及其與臨床病理特征之間關(guān)系。

4、
　　2.分析Gli2、FoxM1與肝癌患者總生存期及無瘤生存期之間的關(guān)系。
　　3.探討Gli2-FoxM1對預(yù)測肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的臨床價值。
　　研究方法：
　　一、臨床樣本的選取
　　肝細胞癌組織及相應(yīng)的癌旁組織標本來自于2008年1月至2012年1月在南昌大學第一附屬醫(yī)院病理科所保存的手術(shù)切除下來的蠟塊組織,共92例。新鮮肝細胞癌及癌旁組織來源于科研中心標本庫所保留的南昌大學第一附屬醫(yī)院普外科行肝癌切

5、除術(shù)時留取的冰凍樣本,共20例。臨床樣本要求來自滿18歲的成人,同時符合既往無其他腫瘤病史,術(shù)前未行任何放化療的原發(fā)性肝細胞癌患者。留取樣本前向患者說明樣本的用途,征得患者同意后再留取樣本。先于病理科查詢行肝癌切除術(shù)的患者,同時記錄該患者的病理資料,后于病案室查詢相關(guān)患者的臨床病例資料,最后對上述所有病人進行隨訪。
　　二、原發(fā)性肝細胞癌中Gli2及FoxM1的檢測
　　將選取的92例標本通過HE染色再次確認其病理診斷,通過

6、免疫組織化學二步法及Western Blot方法檢測Hh信號通路重要組分蛋白Gli2及FoxM1的表達;采用卡方檢驗、秩和檢驗、Spearman rank correlation分析檢驗等統(tǒng)計方法分析原發(fā)性肝細胞癌中Gli2和FoxM1的表達與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系。
　　三、隨訪
　　先于病理科查詢行肝癌切除術(shù)的患者,記錄該患者的病理資料(姓名、腫瘤分級、腫瘤最大徑、肝硬化、脈管侵犯),后于病案室查詢患者的臨床病例資料(住

7、院號、聯(lián)系方式、HBV感染、術(shù)前AFP、術(shù)后有無行TACE術(shù)),最后通過電話及查找患者入院復(fù)查相關(guān)資料等方式對上述所有病人進行隨訪,記錄在2013年6月以前,上述患者術(shù)后治療情況及復(fù)發(fā)、死亡時間。
　　研究結(jié)果：
　　一、Gli2在肝細胞癌中過表達及與臨床病理特征間的關(guān)系。
　　1.在92例原發(fā)性肝細胞癌組織中,Gli2高表達率為56.5％,而其相應(yīng)的正常組織中Gli2高表達率為4.5%,兩者差異具有明顯統(tǒng)計學意義(P

8、<0.001);肝細胞癌組織中Gli2的表達主要集中在細胞核及細胞質(zhì)中,正常組織中Gli2的表達主要集中在細胞質(zhì)中。
　　2. Gli2在肝細胞癌中的表達與患者的性別、年齡、腫瘤直徑、肝硬化、HBV感染、AFP及TNM分期均無明顯相關(guān)。
　　3. Gli2在肝細胞癌中的表達與腫瘤的病理分級、脈管侵犯及BCLC分期均存在明顯相關(guān)。
　　二、FoxM1在肝細胞癌中過表達及與臨床病理特征間的關(guān)系。
　　1.在92例原發(fā)

9、性肝細胞癌組織中,FoxM1的高表達率為48.9%,而其相應(yīng)的正常組織中FoxM1的高表達率為11.9%,兩者差異具有明顯統(tǒng)計學意義(P<0.001);肝細胞癌組織中 FoxM1的表達主要集中在細胞核及細胞質(zhì)中,正常組織中FoxM1的表達主要集中在細胞質(zhì)中。
　　2. FoxM1在肝細胞癌中的表達與患者的性別、年齡、肝硬化、HBV感染、AFP及TNM分期均無明顯相關(guān)。
　　3. FoxM1在肝細胞癌中的表達與腫瘤直徑、病理分

10、級、脈管侵犯及BCLC分期存在明顯相關(guān)。
　　三、Gli2與FoxM1在肝細胞癌中相關(guān)性分析。
　　研究結(jié)果顯示,在Gli2陽性表達的肝細胞癌中FoxM1的表達也呈陽性,且兩者的表達呈現(xiàn)出一致性。Gli2與FoxM1蛋白在肝細胞癌組織中的表達呈現(xiàn)正相關(guān),兩者具有統(tǒng)計學差異(R=0.288,P<0.05)。
　　四、Gli2及FoxM1蛋白與肝細胞癌患者預(yù)后的關(guān)系。
　　Gli2及FoxM1的表達與患者的總生存期和