生物還原響應的葡聚糖修飾的線性聚乙烯亞胺基因釋放載體的研究.pdf

1、納米基因載體可有效提高基因的生物活動率以及增強藥效，是目前基因治療研究的重要研究方向之一。利用納米載體遞送治療基因有許多優(yōu)勢:1）較好地增強基因在體內的穩(wěn)定性;2）延長其在體內的循環(huán)時間;3）增強基因藥物對腫瘤的靶向性;4）降低毒副作用;5）提高生物利用率。目前，納米膠束、脂質體、固體納米粒和納米泡囊因其可控的物理化學屬性，均可作為具有控制釋放基因的納米載體，并具有良好的臨床應用潛力。
　　這篇論文的目的是設計一個結構明確的帶有正

2、電荷的葡聚糖，其可靜脈基因遞送到腫瘤并能夠進行體內轉染。此聚合物是通過二硫鍵連接的葡聚糖和線性聚乙烯亞胺的偶聯物(Dex-SS-LPEI)，其為非病毒載體，可靜脈內基因遞送到Balb/c荷瘤裸鼠體內。通過具有吡啶環(huán)端基的LPEI(2kDa或5kDa)與巰基化葡聚糖(5kDa或10kDa)偶合，成功制備了以葡聚糖作為主鏈、LPEI作為側鏈的聚合物Dex-SS-LPEI。該聚合物能與基因成功鍵合，并具有納米尺寸和中等表面電荷。此外，與沒有進

3、行葡聚糖修飾的22kDa的LPEI相比，該聚合物在生理條件下具有相當好的膠體穩(wěn)定性，并且在細胞內的還原環(huán)境中可以通過二硫鍵斷裂釋放基因。體外轉染實驗表明Dex-SS-LPEI在不同細胞中都能夠進行有效的基因轉染。并發(fā)現5kDa葡聚糖與5kDaLPEI的偶聯物(Dex5k-SS-LPEI5k)具有最好的轉染效率。此外，Dex-SS-LPEI偶聯物通過尾靜脈注射可在Balb/c腫瘤裸鼠內進行全身基因遞送，和22kDa的LPEI的陽性對照組相

4、比，其在HepG2或SKOV-3腫瘤具有更高的轉基因表達。進一步實驗發(fā)現，與22kDa的LPEI相比，10kDa葡聚糖與5kDaLPEI的偶聯物(Dex10k-S S-LPEI5k)在腫瘤內具有較高的基因表達但在肺中具有的較低的基因表達。這項研究的結果表明，在對Dex-SS-PEI偶聯物的性能改善和在荷瘤裸鼠內的基因表達中葡聚糖起著關鍵的作用。在體內Dex-SS-LPEI的細胞毒性低，并且給小鼠注射后小鼠可以成功存活。該研究表明此聚合物