L1型細(xì)胞黏附分子蛋白及mRNA在先天性巨結(jié)腸腸壁表達(dá)的研究.pdf

1、背景及目的先天性巨結(jié)腸癥(Hirschsprung'sdisease，HD)以患兒一部分腸壁缺失副交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞為表現(xiàn)特征，是一種胚胎的后腸發(fā)育畸形。原因是腸肌叢內(nèi)頭尾方向遷移的迷走神經(jīng)母細(xì)胞過(guò)早的停頓而致，是一種神經(jīng)嵴病。L1型細(xì)胞黏附分子(celladhesionmoleculeL1，L1CAM)廣泛表達(dá)于神經(jīng)系統(tǒng)，與腸神經(jīng)元的遷移功能緊密相關(guān)。近來(lái)發(fā)現(xiàn)在部分L1CAM異常表達(dá)導(dǎo)致疾病的患兒同時(shí)合并有HD，但僅限于個(gè)案分析。本研究通

2、過(guò)逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(RT-PCR)及免疫組化方法對(duì)L1CAM基因及相關(guān)蛋白在正常腸壁組織及HD腸壁組織中的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，從蛋白水平及mRNA水平觀察L1CAM的表達(dá)與HD之間的關(guān)系，并由此推測(cè)L1CAM基因在HD發(fā)病原因中的作用。 材料和方法1.應(yīng)用免疫組化技術(shù)觀察48例HD手術(shù)切除標(biāo)本中L1CAM蛋白的表達(dá)，包括48例病變腸段組織(包括擴(kuò)張段和狹窄段)和正常對(duì)照腸壁組織46例。 2.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)觀察

3、16例HD手術(shù)切除標(biāo)本中L1CAMmRNA的表達(dá)，包括16例病變腸段組織(包括擴(kuò)張段和狹窄段)和相應(yīng)對(duì)照正常腸壁組織16例。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所得到的計(jì)量資料分析采用t檢驗(yàn)；方差分析(ANOVA)；最小顯著差法(LSD)法和相關(guān)分析。顯著性水準(zhǔn)取α=0.05。 結(jié)果1.L1CAM蛋自在HD狹窄段中的表達(dá)明顯少于正常對(duì)照腸壁和HD擴(kuò)張段(P=0.001＜0.05)，在正常腸壁和HD擴(kuò)張段腸壁中表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.

4、343＞0.05)。 2.L1CAMmRNA在HD狹窄段的表達(dá)明顯少于HD擴(kuò)張段和正常對(duì)照組(P=0.000＜0.05)，在HD擴(kuò)張段和正常對(duì)照組表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001＜0.05)。 3.L1CAM蛋白與L1CAMmRNA的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(P=0.000＜0.05，γ=0.968)。 結(jié)論1.L1CAM蛋白及mRNA在HD狹窄段的腸壁組織中表達(dá)較正常腸壁組織明顯減少，這種異常分布與腸神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育