氯膦酸二鈉脂質(zhì)體對重癥急性胰腺炎大鼠腹腔巨噬細胞功能的影響.pdf

1、目的：重癥急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)已嚴重危及人類的生命健康，其病程中常出現(xiàn)全身性炎癥反應綜合征、嚴重感染、感染性休克及多器官功能障礙綜合征，導致死亡。隨著對其發(fā)病機制研究的不斷深入，巨噬細胞在SAP時抗原遞呈激活免疫反應中起重要的作用。本研究旨在探討氯膦酸二鈉脂質(zhì)體的制備，同時觀察其對SAP大鼠腹腔巨噬細胞功能的影響。 方法：利用薄膜法制備氯膦酸二鈉脂質(zhì)體；經(jīng)大鼠胰腺被膜下均勻注射

2、?；悄懰徕c制作SAP模型，分離培養(yǎng)大鼠腹腔巨噬細胞，經(jīng)不同劑量的氯膦酸二鈉脂質(zhì)體(50、100、150μ L)作用，然后采用MTT法檢測氯膦酸二鈉脂質(zhì)體對腹腔巨噬細胞增殖的影響，應用中性紅比色法檢測巨噬細胞的吞噬功能，通過檢測NO、O2-·和H2O2的含量來評估巨噬細胞的氧化應激功能，采用Annexin V/PI雙標記法和DNA瓊脂糖凝膠電泳技術檢測巨噬細胞的凋亡情況。 結(jié)果：所制備的脂質(zhì)體直徑100-200nm，clodron

3、ate包裹率為(5.8％)，透射電鏡檢查見其大小均勻。獲得的腹腔巨噬細胞形態(tài)正常，經(jīng)瑞氏染色法鑒定純度＞90％，臺盼藍染色，細胞存活率＞95％。在三種不同濃度氯膦酸二鈉脂質(zhì)體的干預下：MTT結(jié)果顯示巨噬細胞的生長受到明顯抑制(P＜0.01)，抑制率隨藥物作用時間和劑量的增加而增加；巨噬細胞吞噬中性紅結(jié)果表明其吞噬功能受到明顯抑制，抑制率分別為17.4％，25.8％和38.0％；巨噬細胞分泌NO、O2-·的能力也受到明顯抑制，與對照組相比

4、差異具有顯著性(P＜0.05)；巨噬細胞產(chǎn)生H2O2的能力僅在100μL與150μL時受到明顯抑制(P＜0.05)；流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)，在三種不同劑量氯膦酸二鈉脂質(zhì)體干預下，PM凋亡百分率分別為(10.32±0.34)％，(18.16±0.49)％和(29.87±0.35)％，差異均有顯著性(P＜0.01)；經(jīng)1.2％瓊脂糖凝膠電泳顯示，隨氯膦酸二鈉脂質(zhì)體濃度的增高出現(xiàn)漸清晰的特征性梯狀帶。 結(jié)論：利用薄膜法制備氯膦酸二鈉脂質(zhì)體