RNA螺旋酶DHX32對結直腸癌細胞增殖、遷移和侵襲的影響.pdf

1、RNA螺旋酶在RNA加工過程中發(fā)揮重要作用，能夠利用水解NTP產生的能量參與前mRNA剪接、翻譯起始、mRNA轉運、核蛋白體生成、RNA降解以及線粒體和細胞核內RNA轉錄后加工等生物學過程。根據(jù)RNA螺旋酶結構域基序氨基酸殘基序列的不同，RNA螺旋酶分為DHX和DDX兩個家族。已有研究表明多種RNA螺旋酶在腫瘤中表達失調，部分RNA螺旋酶參與細胞分化、細胞周期、細胞凋亡、癌基因表達和腫瘤耐藥基因表達的調控。DHX32是一種新的RNA螺旋

2、酶，屬于DHX家族，在急性淋巴細胞白血病中低表達。先前我們的研究首次報道了DHX32基因在結直腸癌組織中高表達，并且與結直腸癌的發(fā)生部位、組織學分級、癌栓形成、淋巴結轉移和DUKES分期密切相關。然而，DHX32在結直腸癌發(fā)生發(fā)展中的生物學功能和分子機制并不清楚。
　　在本研究中，我們發(fā)現(xiàn)DHX32在結直腸癌細胞株中高表達。為了進一步研究DHX32在結直腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，我們分別構建了DHX32沉默和DHX32過表達的結直腸癌

3、細胞株來進行細胞功能方面的研究。首先我們用了CCK-8，BrdU和細胞克隆形成實驗三種實驗方法來研究DHX32在結直腸癌細胞SW480和HCT-8細胞增殖方面的影響。結果顯示DHX32沉默后抑制了SW480和HCT-8細胞的增殖和克隆形成能力。接著我們又用了transwell的方法研究了DHX32對SW480和HCT-8細胞遷移和侵襲的影響。結果顯示，與對照組相比DHX32沉默后SW480和HCT-8的細胞遷移和侵襲能力明顯降低。我們又

4、做了細胞劃痕愈合實驗進一步驗證DHX32對SW480細胞遷移能力的影響，結果正如我們預想的那樣，DHX32沉默后SW480的細胞愈合能力明顯下降。為了進一步明確我們的實驗結果的可靠性，我們成功構建了SW480細胞的DHX32過表達穩(wěn)轉細胞株，用該細胞株做了細胞增殖，遷移和侵襲實驗。結果顯示DHX32過表達之后促進了SW480細胞的增殖、遷移和侵襲，與上述沉默細胞株所得結果相吻合。最后，我們初步探討了可能的分子機制。我們的研究結果發(fā)現(xiàn)，將