MicroRNA-21影響結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的相關(guān)研究.pdf

1、目的：
　　越來(lái)越多的證據(jù)表明miR-21作為一種癌基因在包括結(jié)直腸癌在內(nèi)的多數(shù)腫瘤中表達(dá)量上調(diào)，通過(guò)抑制靶基因或者信號(hào)通路參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。最近，在乳腺癌和前列腺癌盼研究中發(fā)現(xiàn)Sec23A可以作為抑癌基因發(fā)揮作用，但是在結(jié)直腸癌中關(guān)于Sec23A基因仍未見(jiàn)報(bào)道。因此，本研究通過(guò)體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)，探究了在結(jié)直腸癌中miR-21的生物學(xué)功能及其與Sec23A的相互關(guān)系。
　　方法：
　　通過(guò)檢測(cè)不同結(jié)直腸癌細(xì)胞株中m

2、iR-21和Sec23A表達(dá)量的差異，選擇了miR-21表達(dá)量最低的DLD-1細(xì)胞，通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法將質(zhì)粒miR-21 mimic轉(zhuǎn)染至結(jié)直腸癌DLD-1細(xì)胞，對(duì)于轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞，檢測(cè)細(xì)胞中Sec23A表達(dá)量的變化以及使用CCK-8、劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell小室試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的生物學(xué)功能包括增殖、遷移、侵襲。通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染使DLD-1細(xì)胞低表達(dá)Sec23A，檢測(cè)細(xì)胞的增殖，遷移和侵襲能力的變化。體外實(shí)驗(yàn)，我們也評(píng)估了miR-21對(duì)于

3、小鼠異體腫瘤移植的影響。
　　結(jié)果：
　　體外試驗(yàn)，與對(duì)照組相比，miR-21上調(diào)后結(jié)直腸癌DLD-1細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力明顯增強(qiáng)(all panels，p＜0.01)，但是凋亡能力的變化無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;Sec23A蛋白和基因水平的表達(dá)均下降(p＜0.01，p＜0.05，respectively);下調(diào)Sec23A之后，DLD-1細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲能力明顯增強(qiáng)(all p＜0.05-0.01)。過(guò)表達(dá)miR-21可以

4、促進(jìn)BALB/c裸鼠的生長(zhǎng)并可以抑制Sec23A的表達(dá)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，上調(diào)miR-21之后裸鼠的腫瘤生長(zhǎng)速度和對(duì)照組相比明顯增快(p＜0.05，p＜0.01);剝離腫瘤組織后檢測(cè)的miR-21的表達(dá)量明顯增加(p＜0.05); WB結(jié)果顯示Sec23A蛋白的表達(dá)明顯下降(p＜0.01)，與免疫組化的結(jié)果一致。
　　結(jié)論：
　　MiR-21在結(jié)直腸癌的細(xì)胞株中表達(dá)量是增加的，并且miR-21可以通過(guò)下調(diào)Sec23A增強(qiáng)細(xì)胞的增殖、