丁酸鈉上調(diào)miR-203抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖.pdf

1、目的:
　　丁酸鈉是結(jié)腸腸道內(nèi)細(xì)菌分解膳食纖維的終產(chǎn)物，對(duì)結(jié)直腸癌有抑制作用。近年來(lái)關(guān)于丁酸鈉抗結(jié)直腸癌的作用機(jī)制有大量研究，證實(shí)丁酸鈉可以作為一種組蛋白脫乙酰酶(HDAC)抑制劑發(fā)揮抗癌作用。另外還有研究證實(shí)，丁酸鈉也可通過(guò)調(diào)控微小RNA(miRNA)的表達(dá)抑制結(jié)腸癌細(xì)胞增殖，然而，其中機(jī)制并未完全明確。本實(shí)驗(yàn)中，我們探索了丁酸鈉是否能通過(guò)調(diào)控miR-203的表達(dá)對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞HT-29及Caco-2產(chǎn)生抑制作用，并進(jìn)一步明確了

2、miR-203的靶基因。本實(shí)驗(yàn)豐富了丁酸鈉抗癌作用的機(jī)制，并為結(jié)直腸癌分子靶向治療的新療法提供了理論依據(jù)。
　　材料和方法:
　　應(yīng)用qRT-PCR和Western blot檢測(cè)HT-29及Caco-2細(xì)胞株中丁酸鈉對(duì)miR-203和NEDD9表達(dá)水平的影響;通過(guò)生物信息學(xué)檢索（TargetScan數(shù)據(jù)庫(kù)）預(yù)測(cè)miR-203的靶基因，使用雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)方法進(jìn)一步驗(yàn)證其靶基因;應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)、克隆形成實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞儀、

3、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)評(píng)估丁酸鈉、miR-203、NEDD9對(duì)HT-29及Caco-2細(xì)胞各項(xiàng)生物學(xué)行為的影響;回復(fù)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證miR-203可以通過(guò)調(diào)控其靶基因NEDD9的表達(dá)發(fā)揮影響。
　　結(jié)果:
　　1.丁酸鈉上調(diào)HT-29及Caco-2細(xì)胞中miR-203的表達(dá)水平、下調(diào)NEDD9的表達(dá)水平。
　　2.NEDD9是miR-203的靶基因。
　　3.上調(diào)miR-203的表達(dá)抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖及克隆形