肺結(jié)核患者痰上清液及血清中相關(guān)細胞因子的變化及臨床意義.pdf

1、研究背景與目的：結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis M.TB) 感染引起的慢性傳染病。近年來由于環(huán)境污染的日益加重、糖尿病等發(fā)病率的上升以及AIDS的流行，肺結(jié)核發(fā)病率再次攀升，已成為嚴重危害人類健康的全球性公害。
　　 自80年代中期以來，結(jié)核病發(fā)病率呈回升趨勢，其中機體免疫功能失調(diào)是其原因之一。結(jié)核病最易侵犯的器官是肺，但對肺結(jié)核病變局部細胞免疫反應(yīng)情況尚知之不多，近年來對結(jié)核病免疫

2、反應(yīng)的研究從未間斷過,從機體本身出發(fā)來控制結(jié)核病對控制傳染源具有重大的意義。大量的臨床資料及動物實驗表明，一般結(jié)核病感染者不發(fā)病，但約有5～10％受感染者當(dāng)多種原因引起的機體免疫力下降時，便以10％的速度最終發(fā)展為臨床結(jié)核病。可見,結(jié)核病的發(fā)生和發(fā)展是結(jié)核分枝桿菌與宿主的相互作用的結(jié)果，與機體的免疫狀況息息相關(guān)。近年來,人們在研究結(jié)核病的細胞免疫機制時越來越多的認識到:在結(jié)核病中,眾多的細胞因子參與了結(jié)核病免疫反應(yīng)及免疫病理的發(fā)生和發(fā)展

3、。其中細胞因子TNF-α、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平對結(jié)核病發(fā)病相關(guān)性最大。結(jié)核病免疫病原學(xué)研究顯示,結(jié)核病病變組織的增生、壞死是導(dǎo)致結(jié)核病惡化乃至死亡的直接原因,故結(jié)核病也是機體免疫紊亂的后果,常規(guī)的化療藥物只能殺死病原微生物,不能糾正已經(jīng)啟動的免疫病原性異常免疫反應(yīng),因此調(diào)整結(jié)核分枝桿菌致病后的異常免疫恢復(fù)到正常的狀態(tài)對成功的化療,消滅傳染源具有至關(guān)重大的意義。目前已有部分免疫基礎(chǔ)上發(fā)展起來的細胞因子應(yīng)用于臨床,其在實際

4、中的應(yīng)用越來越被人們所認識,如IFN-γ制劑，TNF-α抑制劑等的使用,但到目前為止尚無明確指導(dǎo)細胞因子的局部治療的臨床依據(jù)。
　　 結(jié)核病是一種與免疫反應(yīng)密切相關(guān)的感染性疾病，其中在結(jié)核分枝桿菌感染的過程中細胞免疫反應(yīng)占主導(dǎo)地位。細胞免疫反應(yīng)是以T 淋巴細胞介導(dǎo)、以巨噬細胞為效應(yīng)細胞的免疫反應(yīng),多種細胞因子構(gòu)成免疫網(wǎng)絡(luò),共同參與了結(jié)核病的免疫應(yīng)答及免疫發(fā)病過程。隨著人們對結(jié)核基礎(chǔ)免疫的研究，目前國內(nèi)外的大多數(shù)學(xué)者認為，細胞因子

5、TNF-α、IL-4、IFN-γ、TGF-β的水平與肺結(jié)核的嚴重程度，活動性，病情預(yù)后等密切相關(guān)。本研究以相關(guān)的研究為基礎(chǔ)，以自身為對照，探討肺結(jié)核患者肺部與外周血細胞因子水平及其相互關(guān)系，肺部細胞因子水平與痰菌量的關(guān)系，以及治療過程中肺部細胞因子水平的變化為臨床開展肺結(jié)核細胞因子治療提供依據(jù)。
　　 方法：
　　 選取2009年9月至2009年12月在廣州市胸科醫(yī)院住院的符合診斷標(biāo)準(zhǔn)的肺結(jié)核患者33例。在患者入院時及治

6、療2周后分別留取痰標(biāo)本及血標(biāo)本。記錄納入研究的肺結(jié)核患者入院時臨床和實驗室資料，如性別，年齡，疾病診斷，細菌學(xué)檢查，胸部影像學(xué)檢查等。痰上清液和血清均采取ELISA的方法測定IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的含量。痰涂片分別行抗酸染色和瑞士-吉姆薩染色，光學(xué)顯微鏡下分別用來觀察痰菌量及痰細胞學(xué)情況。
　　 結(jié)果：
　　 1．肺結(jié)核患者在抗結(jié)核治療前痰上清液中IL-4（171.77±150.17）pg/ml、

7、TNF-α（513.52±340.69）pg/ml、TGF-β（7578.75±4090.65）pg/ml、IFN-γ（342.76±142.20）pg/ml的水平都明顯高于血清IL-4（48.60±18.60）pg/ml、TNF-α（145.06±48.55）pg/ml、TGF-β（181.63±118.73）pg/ml、IFN-γ（16.51±10.79）pg/ml,其中痰上清液中IL-4的水平約是血清中的3.68倍，TNF-α的水

8、平約是血清中的4.03倍，IFN-γ的水平約是血清中的12.40倍，TGF-β的水平約是血清中的65.02倍,兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　 2．治療前痰上清液中IL-4和TNF-α的水平有直線正相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而痰上清液中IFN-γ與IL-4、TNF-α、TGF-β的水平均無明顯相關(guān)，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；痰上清液中TGF-β與IL-4、TNF-α的水平亦無明顯相關(guān)性，無統(tǒng)計學(xué)意義（

9、P>0.05）。
　　 3．治療前血清中IL-4與TNF-α水平無明顯相關(guān)性，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；血清中TGF-β與IFN-γ水平存在直線正相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而血清中IL-4與TGF-β、IFN-γ的水平均無明顯相關(guān)性，無統(tǒng)計學(xué)差異（P值>0.05）；血清中TNF-α與TGF-β、IFN-γ的水平亦無明顯相關(guān)性，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 4．治療前不同痰菌量病人痰上清液中IL-

10、4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平有明顯差異，從各細胞因子的均值及臨床角度來看，痰菌量增多，相關(guān)細胞因子分泌水平不同程度升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。治療前不同痰菌量病人血清中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 5．治療前非空洞型結(jié)核病人痰上清液中相關(guān)細胞因子IL-4（140.73±83.23）pg/ml、TNF-α（463.90±268.22）

11、pg/ml、TGF-β（6482.21±3670.54）pg/ml、IFN-γ（118.90±96.24）pg/ml的水平與空洞型肺結(jié)核病人IL-4（200.99±191.67）pg/ml、TNF-α（560.22±399.89）pg/ml、TGF-β（8610.79±4301.39）pg/ml、IFN-γ（164．96±119.34）pg/ml的水平相比較有明顯差異，從臨床及細胞因子的平均水平來看，空洞型肺結(jié)核病人的相關(guān)細胞因子水平較

12、非空洞型有不同程度的升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 6．非空洞型肺結(jié)核病人血清中相關(guān)細胞因子水平IL-4（47.41±14.45）pg/ml、TNF-α（145.19±58.30）pg/ml、TGF-β（175.47±122.35）pg/ml、IFN-γ（15.95±11.12）pg/ml的水平與空洞型肺結(jié)核病人IL-4（49.71±22.20）pg/ml、TNF-α（144.93±39.10）pg/ml、TGF

13、-β（187.43±118.69）pg/ml、IFN-γ（17.04±10.79）pg/ml的水平相比較無明顯差異，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 7．治療前空洞型肺結(jié)核病人痰IL-4/血IL-4（4.45±4.16）、痰TNF-α/血TNF-α(4.52±4.08)、痰TGF-β/血TGF-β(71.89±57.89)、痰IFN-γ/血IFN-γ(12.55±10.66)較非空洞型肺結(jié)核病人痰IL-4/血IL-4（2.

14、87±1.65）、痰TNF-α/血TNF-α(3.50±2.30)、痰TGF-β/血TGF-β(57.73±51.19)、痰IFN-γ/血IFN-γ(12.26±13.08)有不同程度的升高，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 8．治療2周后痰上清液中IL-4（191.89±126.89）pg/ml、TNF-α（498.35±374.92）pg/ml、TGF-β（6939.69±5008.63）pg/ml、IFN-γ（14

15、5.73±75.21）pg/ml的水平與治療前相比無明顯變化，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　 9．治療2周后肺結(jié)核患者痰上清液中IL-4與TNF-α水平呈直線正相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；痰上清液中TGF-β與TNF-α的水平呈直線正相關(guān)，有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；而痰上清液中IFN-γ與IL-4、TNF-α、TGF-β的水平均無明顯相關(guān)，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；痰上清液中TGF-β與IL-4的水平亦無明

16、顯相關(guān)性，無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　
　　 結(jié)論：
　　 1.肺結(jié)核患者治療前痰上清液中細胞因子IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平較血清中明顯增高，其中痰上清液中IL-4的水平約是血清中的3.68倍，TNF-α的水平約是血清中的4.03倍，IFN-γ的水平約是血清中的12.40倍，TGF-β的水平約是血清中的65.02倍。
　　 2.隨著痰菌量增多，痰上清液中IL-4、TN

17、F-α、TGF-β、IFN-γ的水平不同程度的升高，而血清中相關(guān)細胞因子變化不明顯。
　　 3.空洞型肺結(jié)核病人較非空洞型肺結(jié)核病人痰上清液中IL-4、TNF-α、TGF-β、IFN-γ的水平不同程度增高，而血清中相關(guān)細胞因子變化不明顯；空洞型肺結(jié)核病人較非空洞型肺結(jié)核病人痰上清液與血清中相關(guān)細胞因子的比值有不同程度的升高。
　　 4.治療前與治療2周后痰上清液中IL-4與TNF-α的水平均呈直線正相關(guān)，而血清中IL