RNAi沉默CtBP1基因?qū)θ烁伟┘毎闔epG2生物學行為的影響.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩83頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、目的: 通過觀察siRNA對人肝癌細胞株HepG2內(nèi)CtBP1基因及其靶基因E-cadherin表達的影響,和對HepG2細胞增殖、細胞周期、凋亡及侵襲力的影響,初步探導(dǎo)CtBP1基因在調(diào)節(jié)肝癌發(fā)生發(fā)展中的可能作用。為進一步研究肝癌或其他腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制及治療靶基因?qū)ふ业难芯刻峁├碚摶A(chǔ)。
　　方法: 采用X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent為載體介導(dǎo)Control siRNA(Flu

2、orescein Conjugate)-A轉(zhuǎn)染入HepG2細胞,在倒置熒光相差顯微鏡下觀察,觀測轉(zhuǎn)染效率。實驗分空白對照組、轉(zhuǎn)染試劑對照組、陰性序列對照組及干擾組,以 X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent為載體介導(dǎo)Control siRNA-A與CtBP1 siRNA(h)轉(zhuǎn)染入HepG2細胞,RT-PCR法和Western Blot法分別從核酸水平和蛋白質(zhì)水平檢測CtBP1基因與E-cadher

3、in基因的表達情況;MTT法檢測HepG2細胞增殖的情況;流式細胞術(shù)檢測HepG2細胞周期與凋亡的變化;Transwell小室法檢測HepG2細胞侵襲力的變化。
　　結(jié)果: 觀察到siRNA轉(zhuǎn)染入HepG2細胞,轉(zhuǎn)染效率達85％以上;與3個對照組相比,干擾組CtBP1mRNA及CtBP1的表達水平下調(diào),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),CtBP1mRNA抑制率達38.11%,蛋白制率達62.39%,3個對照組之間的差異無統(tǒng)計學意

4、義(P>0.05);與3個對照組相比,干擾組E-cadherin mRNA及E-cadherin的表達水平上調(diào),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),3個對照組之間的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與對照組相比,干擾組細胞增殖明顯受到抑制,生長抑制率在轉(zhuǎn)染后24、48、72、96h分別平均達到22.34%,52.15%,53.97%和54.77%,3個對照組之間細胞增殖的差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05);空白對照組、轉(zhuǎn)染試劑對照組、

5、陰性序列對照組及干擾組之間細胞周期各時相細胞數(shù)的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);與對照組相比,干擾組的細胞凋亡率明顯升高,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),對照組之間細胞凋亡率的差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05);與對照組相比,干擾組平均每高倍視野下穿膜細胞數(shù)明顯減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05),3個對照組之間穿膜細胞數(shù)的差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結(jié)論: CtBP1 siRNA(h)已轉(zhuǎn)染入人肝癌細胞

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論