Pokemon基因?qū)θ私Y(jié)腸癌細(xì)胞株SW480生物學(xué)行為影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的通過RNAi下調(diào)人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480 Pokemon基因的表達(dá)水平，了解Pokemon基因?qū)W480生物學(xué)行為的影響，研究Pokemon基因在人結(jié)腸癌中的作用，探討Pokemon的致癌機(jī)制。
　　 方法 構(gòu)建靶向人Pokemon基因的特異性RNAi干擾質(zhì)粒psiRNA1～3，脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480；檢測轉(zhuǎn)染前后SW480 Pokemon基因、P53基因在mRNA水平的表達(dá)，細(xì)胞增殖、凋亡以及細(xì)胞周期時相

2、的變化。
　　 結(jié)果 psiRNA1～3干預(yù)人結(jié)腸癌細(xì)胞株SW480后，Pokemon基因表達(dá)下調(diào)，P53基因表達(dá)上調(diào)，細(xì)胞增殖變緩、凋亡增加、細(xì)胞周期阻滯于G1/S期，以干擾質(zhì)粒psiRNA3作用最強(qiáng)。與空白對照組比較，Pokemon mRNA表達(dá)水平(Pokemon/GAPDH)由40.65[％]分別下調(diào)至29.71[％](P<0.01)、22.59[％](P<0.01)和16.41[％](P<0.01)，P53 mRNA表

3、達(dá)水平(P53/GAPDH)由52.95[％]上調(diào)至72.76[％](P<0.05)、71.30[％](P<0.05)和84.58[％](P<0.01)；細(xì)胞存活率明顯下降，分別降至61.42[％](P<0.05)、56.85[％](P<0.05)和54.87[％](P<0.01)；凋亡率由7.03[％]分別上升至14.46[％](P<0.01)、10.25[％](P<0.05)和19.46[％](P<0.01)；G1/S期細(xì)胞占全部細(xì)