促紅細胞生成素在蛛網膜下腔出血后的保護作用.pdf

1、背景和目的： 動脈瘤性蛛網膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)后的病理生理機制復雜，蛛網膜下腔的血液及血液分解產物的毒性作用、氧自由基產生、炎癥反應、NO途徑及血管內皮凋亡等途徑參與腦血管痙攣(cerebrovascularvasospasm，CVS)的發(fā)生和發(fā)展，上述病理生理變化多數又是造成腦損傷的原因。臨床上，藥物治療主要集中在預防和緩解腦血管痙攣和腦保護兩方面。近年來，促紅細胞生成素(ery

2、thropoietin，EPO)的腦保護作用已經得到廣泛的研究。在體內或體外的多種動物實驗模型(包括缺血模型、壓迫和挫傷模型、紅藻氨酸誘發(fā)的癲癇模型、多發(fā)性硬化模型及高血糖等模型)中都證實EPO對不同的致傷因子均具有腦保護作用。并提出了多種機制解釋EPO對神經的保護作用，包括抑制活性氧家族和興奮性氨基酸——谷氨酸的產生，刺激血管再生，調節(jié)突觸轉運，抑制凋亡，調節(jié)炎癥反應及神經營養(yǎng)作用等。最近的研究中發(fā)現EPO除了腦保護作用外，對SAH后

3、的CVS也有明顯的緩解作用。EPO在SAH后緩解CVS和腦保護作用目前處于動物實驗研究階段，對于EPO緩解CVS的機制并不明確，而且有關利用EPO能否減輕SAH后CVS和減少神經元死亡起到腦保護作用的研究，相關報道甚少，國內未見報道。本研究試圖在動物實驗中驗證EPO是否具有緩解SAH后CVS以及腦保護的作用，并通過分析血管內皮的凋亡情況和血管痙攣程度的關系推斷EPO保護血管內皮是否可能是其緩解CVS的機制之一。 材料和方法：

4、 30只雄性新西蘭白兔，體重2.8-3.3 kg，隨機平均分為5組：空白組、陰性對照組(枕大池注入生理鹽水)、SAH組、SAH+安慰劑組和SAH+HuEPO組。采用枕大池一次注血(非抗凝自體動脈血2m1)的方法建立SAH模型。模型建立后48小時，取腦脊液后采用活體灌注法將動物處死。留取基底動脈標本及顳葉皮層組織。用原位細胞凋亡檢測法(TUNEL)分別檢測基底動脈內皮細胞、顳葉皮層神經元凋亡情況，并通過測定基底動脈血管橫截面積來判斷有

5、無腦血管痙攣。用酶聯免疫吸附(ELISA)法測定腦脊液中S-100B蛋白含量。 結果：空白組和陰性對照組之間，SAH組和SAH+安慰劑組之間各項指標檢測無統(tǒng)計學差異。基底動脈橫截面積測定的結果提示SAH組及SMH+安慰劑組較空白組和陰性對照組明顯縮小(P<0.01)，而SAH+HuEPO組較SMH組及SAH+安慰劑組明顯增大(P<0.01)；TUNEL染色顯示SAH+rHuEPO組基底動脈內皮細胞、顳葉皮層神經元凋亡程度較SAH

6、組及SMH+安慰劑組明顯減輕(P<0.05)；而SAH+rHuEPP組腦脊液S-100B蛋白含量較SAH組和SAH+安慰劑組明顯減少(P<0.05)。基底動脈橫截面積、內皮細胞凋亡率、神經元凋亡率和腦脊液S100B蛋白含量這四項指標兩兩之間均具有良好的相關性，其中基底動脈橫截面積和內皮細胞凋亡率，神經元凋亡率和腦脊液S100B蛋白含量之間相關系數最高。 結論：早期使用 rHuEPO能減少兔枕大池注血模型基底動脈內皮細胞的凋亡并減