潛在轉移相關因子DLL4、YKL-40、MMP-9與胰腺癌預后關系的研究.pdf

1、胰腺癌是惡性程度最高的腫瘤之一，目前手術治療是最有效的方法，然而術后5年生存率仍然不超過20％。探討術后早期復發(fā)和轉移的相關因素，有助于開發(fā)相應臨床治療措施，這將明顯改善患者預后，并具有重要的臨床意義。
　　 腫瘤周圍血管生成與間質重塑在胰腺癌術后復發(fā)和轉移中具有重要作用。血管內皮生長因子(VEGF)信號通路是促進胰腺癌細胞生長及腫瘤周圍血管重建的重要途徑之一。研究已證實Notch信號通路配體蛋白DLL4是VEGF通路的負性調節(jié)

2、因子，通過對血管內皮生長因子受體2(VEGFR-2)的作用而調控VEGF信號。抑制DLL4表達將導致腫瘤組織生成大量無功能血管，造成腫瘤組織血供不足而致其生長受到抑制。最近的研究顯示DLL4在肺癌等惡性腫瘤中高表達，并與患者不良預后顯著相關。DLL4-Notch信號通路可能與胰腺癌發(fā)生、發(fā)展密切相關。故推測DLL4高表達可能與胰腺癌術后復發(fā)與轉移有關。
　　 腫瘤細胞及相關間質細胞合成、分泌人軟骨糖蛋白39(HC-gp39，YK

3、L-40)和基質金屬蛋白酶9(MMP-9)。前期研究表明MMP-9可降解血管基底膜與細胞外基質成分，并正向調節(jié)VEGF信號通路以刺激血管發(fā)生；YKL-40蛋白與VEGF信號通路亦有一定相關性，可能通過提高VEGFR-2的表達而增強血管新生。因此，推測MMP-9、YKL-40高表達也可能與胰腺癌術后復發(fā)和轉移有關。
　　 為驗證上述研究假設，明確DLL4、YKL-40、MMP-9與胰腺癌手術預后關系，本課題開展了以下兩個方面的研究

4、。
　　 一、DLL4與胰腺癌預后關系
　　 目的：檢測DLL4、VEGFR-2蛋白在胰腺導管腺癌組織中的表達水平及其相關性，明確兩者對手術后患者預后的影響，并探究DLL4是否具有獨立預后價值。
　　 材料與方法：采用雙向性隊列研究設計。研究對象來自2005年1月至2009年12月期間長海醫(yī)院收治的病理確診為胰腺導管腺癌的連續(xù)初診病例。所有患者均經手術治療，術前未行化療、放療。調查內容包括人口學特征、個人生活習慣

5、、病史、術前臨床表現(xiàn)、實驗室檢查結果、術中情況、術后情況、總生存期、疾病無進展生存期等。通過查閱病歷、電話隨訪與門診復診獲得上述資料。隨訪截止時間為2010年9月30日。同時收集研究對象手術切除組織的石蠟標本，采用免疫組織化學方法檢測其DLL4、VEGFR-2的表達情況。采用統(tǒng)計學Kaplan-Meier及Cox回歸分析法，評價DLL4在癌組織中的表達變化對患者生存期的影響，并通過卡方檢驗與多因素logistic回歸分析法，明確DLL4

6、表達水平與TNM分期、淋巴結轉移及VEGFR-2表達的關系。
　　 結果：本研究共隨訪胰腺導管腺癌患者89例，年齡中位數(shù)為58歲(年齡范圍35-78歲)，其中男性占61.8％，隨訪時間中位數(shù)為12個月(時間范圍2-49個月)。排除術后一個月內死亡的病例后，共82例患者納入生存分析?；颊咧形豢偵鏁r間(95％可信區(qū)間)、無進展生存時間(95％可信區(qū)間)分別為12(10.2-13.8)個月與6(4.3-7.7)個月。38例(42.7

7、％)患者DLL4高表達，64例(71.9％)患者VEGFR-2高表達。
　　 1、DLL4表達與預后關系
　　 單因素分析結果顯示，總生存時間、無進展生存時間分別與DLL4表達、VEGFR-2表達、CA19-9、血小板計數(shù)/淋巴細胞計數(shù)比值(PLR)、糖尿病病史、手術切緣狀態(tài)、腫瘤大小、TNM分期、分化程度、術后化療、術后放療、術后并發(fā)癥潛在相關(P<0.25)；DLL4或VEGFR-2低表達者預后優(yōu)于DLL4或VEGF

8、R-2高表達者(P<0.05)；DLL4低表達且VEGFR-2高表達者預后類似于DLL4低表達且VEGFR-2低表達者，但優(yōu)于DLL4高表達且VEGFR-2高表達者預后(P<0.001)。
　　 多因素分析結果表明，DLL4高表達、手術切緣陽性、未行術后放療、術后并發(fā)癥均為總生存時間及無進展生存時間下降的獨立預測因子(P<0.05)。
　　 2、DLL4表達與臨床特征關系
　　 DLL4表達分別與VEGFR-2表

9、達、腫瘤大小、TNM分期、腫瘤局部浸潤、淋巴結轉移、遠處轉移、術后腫瘤復發(fā)等明顯相關(P<0.05)。
　　 3、DLL4表達與TNM分期
　　 單因素分析結果顯示，TNM分期分別與DLL4表達、VEGFR-2表達、PLR、中性粒細胞計數(shù)/淋巴細胞計數(shù)比值(NLR)、腫瘤部位潛在相關(P<0.25)。
　　 多因素分析結果顯示，DLL4高表達、低PLR均與高等級TNM分期顯著相關(P<0.01)。
　　

10、4、DLL4表達與淋巴結轉移關系
　　 單因素分析結果顯示，淋巴結轉移分別與性別、DLL4表達、VEGFR-2表達、糖尿病病史、生化指數(shù)潛在相關(P<0.25)。
　　 多因素分析結果顯示，DLL4高表達、高分值生化指數(shù)均與淋巴結轉移明顯相關(P<0.05)。
　　 結論：胰腺導管腺癌組織高表達DLL4與術后患者生存期下降、高等級TNM分期及淋巴結轉移顯著相關，故DLL4-Notch信號通路的靶向治療可能會改善胰

11、腺癌患者的手術預后。
　　 二、YKL-40、MMP-9與胰腺癌預后關系
　　 目的：檢測YKL-40、MMP-9、DLL4蛋白在胰腺導管腺癌組織中的表達水平，明確三者對手術后患者生存期的影響，并探討與腫瘤TNM分期及區(qū)域淋巴結轉移相關的因素，揭示YKL-40、MMP-9、DLL4在預測腫瘤不良進展中可能存在的協(xié)同關系。
　　 材料與方法：采用雙向性隊列研究設計。研究對象來自2005年1月至2009年12月期間長

12、海醫(yī)院收治的病理確診為胰腺導管腺癌的連續(xù)初診病例。所有患者均經手術治療，術前未行化療、放療。通過查閱病歷收集患者臨床及流行病學資料，其中包括人口學特征、個人史、既往病史、術前臨床表現(xiàn)、實驗室檢查結果、手術記錄、術后情況等；通過電話及門診復診獲取隨訪信息，包括總生存期、疾病無進展生存期、術后放療及化療情況等。隨訪截止時間為2011年12月31日。采用免疫組織化學方法檢測腫瘤標本中YKL-40、MMP-9、DLL4的表達情況。所有數(shù)據(jù)均采用

13、統(tǒng)計學Kaplan-Meier及Cox回歸分析法，評價YKL-40、MMP-9、DLL4在癌組織中的表達變化對患者生存期的影響，并通過卡方檢驗與多因素logistic回歸分析法，明確YKL-40表達水平與TNM分期、淋巴結轉移的關系。
　　 結果：本研究共隨訪胰腺導管腺癌患者229例，年齡中位數(shù)為59歲(年齡范圍35-81歲)，其中男性占62.0％，隨訪時間中位數(shù)為11個月(時間范圍2-51個月)。YKL-40、MMP-9、DL

14、L4在229例胰腺導管腺癌組織中高表達者分別為156例(68.1％)、152例(66.4％)與139例(60.7％)。術后一個月內死亡的患者未納入生存分析?；颊咧形豢偵鏁r間(95％可信區(qū)間)、無進展生存時間(95％可信區(qū)間)分別為11(10.1-11.9)個月與6(5.2-6.8)個月。
　　 1、YKL-40表達與預后關系
　　 單因素分析結果顯示，總生存時間分別與YKL-40、DLL4、MMP-9、CA19-9、C

15、EA、手術切緣、腫瘤大小、TNM分期、腫瘤分化、術后放化療、性別潛在相關(P<0.20)；無進展生存時間分別YKL-40、DLL4、MMP-9、CA19-9、CEA、手術切緣、腫瘤大小、TNM分期、術后放化療、術后并發(fā)癥、性別潛在相關(P<0.20)。
　　 多因素分析結果表明，YKL-40高表達、DLL4高表達、CEA升高、腫瘤長徑大、高等級TNM分期、腫瘤分化程度低、術后未行放療均為總生存時間下降的獨立預測因子(P<0.05

16、)；YKL-40高表達、CEA升高、高等級TNM分期、手術切緣陽性、術后未行放療、術后并發(fā)癥均為無進展生存時間下降的的獨立預測因子(P<0.01)。
　　 2、YKL-40表達與TNM分期
　　 單因素分析結果顯示，TNM分期分別與YKL-40表達、DLL4表達、MMP-9表達、腫瘤大小、腫瘤位置、生化指數(shù)、PLR、NLR潛在相關(P<0.20)。
　　 多因素分析結果顯示，腫瘤長徑大、胰體尾部腫瘤均與高等級TN

17、M分期顯著相關(P<0.05)。
　　 3、YKL-40表達與淋巴結轉移關系
　　 單因素分析結果顯示，淋巴結轉移分別與YKL-40表達、DLL4表達、MMP-9表達、CA19-9、腫瘤大小、腫瘤位置潛在相關(P<0.20)。
　　 多因素分析結果顯示，YKL-40高表達、胰頭部腫瘤均與淋巴結轉移明顯相關(P<0.01)。
　　 結論：胰腺導管腺癌組織高表達YKL-40與術后患者生存期下降、淋巴結轉移顯著