轉(zhuǎn)移相關(guān)基因S100A4在胰腺癌中作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的：應(yīng)用小干擾RNA（siRNA）干擾胰腺癌細(xì)胞S100A4表達(dá)，進(jìn)一步闡明S100A4與胰腺癌增殖、凋亡的關(guān)系及作用機(jī)制，探討siRNA的干擾S100A4對胰腺癌吉西他濱（GEM）、奧沙利鉑（OXA）化療敏感性及放射敏感性的影響，為S100A4作為胰腺癌基因治療的有效靶點(diǎn)的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
　　方法：（1）用MTT法檢測siRNA干擾S100A4前后人胰腺癌株BxPC-3、AsPC-1體外生長曲線，并計(jì)算細(xì)胞抑制率；（2

2、）應(yīng)用TUNEL法檢測siRNA干擾S100A4前后人胰腺癌株BxPC-3、AsPC-1細(xì)胞凋亡，并計(jì)算細(xì)胞凋亡率；（3）應(yīng)用RT-PCR檢測siRNA干擾S100A4的干擾效果及干擾前后，S100A4與COX-2、Survivin、MMP9、bcl-2之間的關(guān)系，揭示S100A4在胰腺癌中可能的作用機(jī)制；（4）用MTT法檢測siRNA干擾前后GEM、OXA對人胰腺癌株BxPC-3、AsPC-1化療敏感性的影響，并計(jì)算GEM、OXA的I

3、C50值即中效濃度；（5）用克隆形成率法檢測放射療法對siRNA干擾S100A4前后人胰腺癌株BxPC-3、AsPC-1對放射敏感性的影響，并計(jì)算克隆形成率；
　　結(jié)果：（1）經(jīng)siRNA干擾S100A4后細(xì)胞增殖受到抑制，生長曲線及抑制率直方圖可表示。（2）干擾S100A4后細(xì)胞凋亡增加（P<0.05）。（3）siRNA干擾S100A4后COX-2、survivin、bcl-2、MMP-9不同程度表達(dá)下降（P<0.05）。(4)

4、MTT結(jié)果顯示：BxPC-3細(xì)胞對照組吉西他濱IC50為9.95±0.34mmol/L；陰性轉(zhuǎn)染組吉西他濱IC50為：9.641±0.434mmol/L；干擾組吉西他濱IC50為：1.182±0.175μmol/L；AsPC-1細(xì)胞對照組吉西他濱IC5064.15±3.41mmol/L；陰性轉(zhuǎn)染組吉西他濱IC50為：65.19±4.4mmol/L；干擾組吉西他濱IC50為：1.962±0.113mmol/L；P<0.05。人胰腺癌細(xì)胞B

5、xPC-3對照組奧沙利鉑IC50為4.885±0.156mmol/L；陰性轉(zhuǎn)染組奧沙利鉑IC50為：4.611±0.334mmol/L；干擾組奧沙利鉑IC50為：1.963±0.175mmol/L；AsPC-1細(xì)胞對照組奧沙利鉑IC503.838±0.212mmol/L；陰性轉(zhuǎn)染組奧沙利鉑IC50為：3.912±0.400mmol/L；干擾組奧沙利鉑IC50為：1.962±0.113mmol/L；P<0.05。（5）siRNA干擾S10

6、0A4后BxPC-3細(xì)胞SF2值分別是：對照組0.681±0.02；陰性對照組0.650±0.01；干擾組0.381±0.02，P<0.05;AsPC-1細(xì)胞SF2值分別是：對照組0.479±0.02；陰性對照組0.468±0.02；干擾組：0.365±0.04，P<0.05。
　　結(jié)論：（1）siRNA干擾S100A4后抑制胰腺癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并不同程度增加胰腺癌細(xì)胞放射敏感性,增加吉西他濱及奧沙利鉑化療敏感性。（2）