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1、目的:通過(guò)研究姜黃素對(duì)SGC-7901胃癌細(xì)胞株的P300、c-myc、P53基因、乙?;M蛋白H3和H4表達(dá)及對(duì)細(xì)胞增殖的影響,探討姜黃素抗胃癌的分子機(jī)制,從而為姜黃素臨床抗癌提供理論依據(jù)。
方法:用0、5、10、20、40μmol/L姜黃素作用于人胃癌細(xì)胞株SGC-7901,分別共同培養(yǎng)24、48和72小時(shí)后,MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖,RT-PCR法檢測(cè)p300、p53、c-myc基因的mRNA的表達(dá),蛋白免疫印跡法檢測(cè)P30
2、0蛋白、乙酰化組蛋白H3、H4的蛋白表達(dá),免疫組化法檢測(cè)P53、c-myc蛋白表達(dá)。
結(jié)果: MTT比色法結(jié)果顯示:5、10、20、40μmol/L姜黃素能抑制 SGC-7901胃癌細(xì)胞株的增殖,與對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);各藥物處理組之間的兩兩比較顯示也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),呈時(shí)間及劑量依賴性。RT-PCR檢測(cè)到P300、c-myc基因的mRNA表達(dá)量隨姜黃素濃度增加而表達(dá)下降(P<0.05),有一定
3、的時(shí)效和量效關(guān)系,且P300與c-myc基因之間存在著正相關(guān)(r=0.83),而p53基因的mRNA不受影響(P>0.05)。Western blot檢測(cè)到姜黃素作用后P300蛋白和組蛋白H3、H4的蛋白表達(dá)量隨濃度和時(shí)間的增加而表達(dá)下降(P<0.05),且每一藥物處理組與對(duì)照組比較都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。藥物處理組之間比較也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。免疫組化分析發(fā)現(xiàn)胃癌細(xì)胞中C-myc蛋白表達(dá)量隨姜黃素的濃度的升高而下降
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