LY294002對胃癌細(xì)胞SGC7901增殖及相關(guān)調(diào)控因子的影響.pdf

1、目的：檢測LY294002作用于人源胃癌細(xì)胞株SGC7901后對細(xì)胞增殖凋亡及相關(guān)調(diào)控因子的影響，研究阻斷P13K/Akt信號通路對胃癌的作用及機(jī)制。
　　 方法：采用MTT法檢測LY294002對SGC7901細(xì)胞的增殖抑制率；倒置顯微鏡觀察SGC7901的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；采用AnnexinV/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)分析SGC7901細(xì)胞凋亡細(xì)胞比例；RT-PCR檢測 NAG-1、Skp2 mRNA的表達(dá)情況，western bl

2、ot檢測磷酸化Akt（p-Akt）和總Akt（t-Akt）的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：LY294002可明顯抑制SGC7901的生長，呈時(shí)間-劑量依賴性，50μmol/L的LY294002作用24h的增殖抑制率可達(dá)75％；SGC7901細(xì)胞在LY294002作用后出現(xiàn)典型的細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，部分細(xì)胞變圓漂浮，部分細(xì)胞固縮、分解，并出現(xiàn)細(xì)胞碎片；經(jīng)10、30、50μmol/L的LY294002作用12小時(shí)后的凋亡率依次為（12.74±

3、0.42）％，（36.5士0.45）％、（64.1士0.79）％，明顯高于空白對照組的（2.3士0.36）％（P<0.01）；LY294002可下調(diào)p-Akt的蛋白表達(dá)（P<0.05），而t-Akt未受影響；LY294002可上調(diào)NAG-1 mRNA表達(dá)，下調(diào)Skp2 mRNA表達(dá)，差異具有顯著性（P<0.05）。
　　 結(jié)論：LY294002能明顯抑制胃癌細(xì)胞SGC7901的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能與其抑制Akt磷酸化阻