蛋白酶激活受體-2在胃粘膜保護(hù)中的作用和機(jī)制.pdf

1、目的：建立大鼠應(yīng)激性潰瘍(stressulcer,SU)模型。觀察應(yīng)用人工合成的PAR-2激動(dòng)劑、辣椒素和奧美拉唑預(yù)處理大鼠后，大鼠體內(nèi)舒張和收縮因子是否有變化及其和PAR-2激動(dòng)劑的關(guān)系。探討PAR-2在大鼠SU中的預(yù)防機(jī)制，為胃粘膜損傷的治療提供一個(gè)重要治療靶點(diǎn)。 方法：采用水浸束縛應(yīng)激(water-immersionrestraintstress,WRS)模型方法制作大鼠SU模型，40只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為：①陰性

2、對(duì)照組(n=8)，②奧美拉唑組(n=8)，③PAR-2激動(dòng)劑組(n=8)，④辣椒素組(n=8)，⑤不應(yīng)激組(n=8)。其中一組為不應(yīng)激組，不給予冷束縛應(yīng)激實(shí)驗(yàn)，直接取血液和胃粘膜；另外四組為實(shí)驗(yàn)組，給予冷束縛應(yīng)激實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組大鼠在水浸束縛前24小時(shí)禁食，禁水2小時(shí)。其中陰性對(duì)照組，在應(yīng)激半小時(shí)前給予1ml生理鹽水腹腔注射；奧美拉唑組于應(yīng)激前半小時(shí)給予5mg/Kg奧美拉唑注射液腹腔注入；PAR-2激動(dòng)劑組于應(yīng)激前半小時(shí)給予1.5μmol/

3、KgPAR-2激動(dòng)劑腹腔注入；辣椒素組于0，6，32小時(shí)分別給予25，50，50mg/Kg辣椒素皮下注射，正常飼養(yǎng)14天后，于應(yīng)激前半小時(shí)給予1.5μmol/KgPAR-2激動(dòng)劑腹腔注入。水浸束縛應(yīng)激后，肉眼計(jì)算胃粘膜潰瘍指數(shù)(ulcerindex,UI)；取動(dòng)脈血和胃液做血?dú)夥治鲇?jì)算胃粘膜內(nèi)pH(gastricintramucosalpH，pHi)；應(yīng)用分光光度計(jì)檢測(cè)胃粘膜氨基己糖、H+K+-ATP酶活力和血漿一氧化氮(nitroge

4、nmonoxidum,NO)；采用放射免疫方法檢測(cè)血漿中內(nèi)皮素(endothelin，ET)、血栓素B2(thromboxaneB2，TXB2)和6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α，6-K)；觀察胃組織病理形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果：1成功建立大鼠SU模型。 2PAR-2激動(dòng)劑組與陰性對(duì)照組比較。2.1pHi：PAR-2激動(dòng)劑組(4.71±0.23)比陰性對(duì)照組(4.53±0.11)明顯升高(p＜0.01)。2.2氨

5、基己糖：PAR-2激動(dòng)劑組(5.26±1.48)比陰性對(duì)照組(1.19±0.58)明顯升高(p＜0.01)。2.3NO：PAR-2激動(dòng)劑組(62.20±6.91)比陰性對(duì)照組(52.50±9.60)明顯升高(p=0.033)。2.46-K：PAR-2激動(dòng)劑組(856.92±165.21)比陰性對(duì)照組(654.50±221.31)明顯升高(p＜0.05)。2.5TXB2：PAR-2激動(dòng)劑組(338.67±12.91)比陰性對(duì)照組(378.

6、89±15.10)明顯降低(p＜0.01)。2.6ET：PAR-2激動(dòng)劑組(48.53±8.26)比陰性對(duì)照組(98.18±39.24)明顯降低(p＜0.01)。2.7UI：PAR-2激動(dòng)劑組(37.50±24.42)比陰性對(duì)照組(69.00±33.27)明顯降低(p=0.01)。2.8病理形態(tài)學(xué)觀察，PAR-2激動(dòng)劑組無明顯血栓形成，陰性對(duì)照組有血栓形成。2.9H+K+-ATP酶活力：PAR-2激動(dòng)劑組(7.32±2.10)與陰性對(duì)照

7、組(7.95±2.82)數(shù)值相近(p＞0.05)。 3PAR-2激動(dòng)劑組與奧美拉唑組比較。3.1pHi：PAR-2激動(dòng)劑組(4.71±0.23)與奧美拉唑組(4.72±0.47)數(shù)值相近(p=0.872)。3.2氨基己糖，PAR-2激動(dòng)劑組(5.26±1.48)與奧美拉唑組(5.20±2.69)數(shù)值相近(p＞0.05)。3.3NO：PAR-2激動(dòng)劑組(62.20±6.91)與奧美拉唑組(54.06±10.65)數(shù)值相近(p＞0.

8、05)。3.46-K：PAR-2激動(dòng)劑組(856.92±165.21)比奧美拉唑組(687.60±219.50)明顯升高(p＜0.05)。3.5TXB2：PAR-2激動(dòng)劑組(338.67±12.91)比奧美拉唑組(359.41±16.49)明顯降低(p＜0.01)。3.6ET：PAR-2激動(dòng)劑組(48.53±8.26)比奧美拉唑組(77.46±17.11)明顯降低(p＜0.01)。3.7UI：PAR-2激動(dòng)劑組(37.50±24.42)

9、與奧美拉唑組(26.88±14.13)數(shù)值相近(p=0.357)。3.8病理形態(tài)學(xué)觀察均表現(xiàn)為無明顯血栓形成。3.9H+K+-ATP酶活力：PAR-2激動(dòng)劑組(7.32±2.10)比奧美拉唑組(7.95±2.82)明顯降低(p＜0.05)。 4辣椒素組與陰性對(duì)照組比較。4.1pHi：辣椒素組(4.43±0.63)與陰性對(duì)照組(4.53±0.11)數(shù)值相近(p＞0.05)。4.2氨基己糖：辣椒素組(2.13±1.39)與陰性對(duì)照組

10、(1.19±0.58)數(shù)值相近(p＞0.05)；4.3NO：辣椒素組(49.88±7.00)與陰性對(duì)照組(52.50±9.60)數(shù)值相近(p＞0.05)。4.46-K：辣椒素組(675.06±139.92)與陰性對(duì)照組(654.50±221.31)數(shù)值相近(p＞0.05)。4.5TXB2：辣椒素組(358.40±13.80)比陰性對(duì)照組(378.89±15.10)明顯減少(p＜0.01)。4.6ET：辣椒素組(70.04±8.76)比陰

11、性對(duì)照組(98.18±39.24)明顯減少(p＜0.01)。4.7UI：辣椒素組(59.00±12.46)與陰性對(duì)照組(69.00±33.27)數(shù)值相近，(p＞0.05)。4.8病理形態(tài)學(xué)觀察，均有血栓形成。4.9H+K+-ATP酶活力：辣椒素組(5.46±3.78)與陰性對(duì)照組(7.95±2.82)數(shù)值相近(p＞0.05)。 結(jié)論：1在WRS誘發(fā)大鼠SU過程中，伴有胃粘膜缺血、缺氧，舒張血管因子釋放減少，收縮血管因子釋放增加，

12、這些因素可能導(dǎo)致血管收縮，并伴有血栓形成，最終造成胃粘膜血流量下降，導(dǎo)致應(yīng)激性潰瘍的發(fā)生。 2在WRS之前給予PAR-2激動(dòng)劑后，可減輕胃粘膜屏障損傷程度，增加舒張血管因子的釋放，減少收縮血管因子釋放，這些因素可能造成擴(kuò)張血管，改善胃粘膜缺血缺氧，增加胃粘膜血流量。PAR-2激動(dòng)劑預(yù)防應(yīng)激性潰瘍效果和奧美拉唑相近。 3應(yīng)用辣椒素后，PAR-2激動(dòng)劑保護(hù)胃粘膜作用基本消失，表明蛋白激酶受體-2可能是通過激動(dòng)辣椒素敏感性神經(jīng)