早期環(huán)境干預(yù)對(duì)缺氧缺血性腦損傷新生鼠神經(jīng)絲蛋白表達(dá)及超微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的：缺氧缺血性腦損傷(hypoxic-ischemicBrainDamage，HIBD)是圍產(chǎn)期嚴(yán)重威脅新生兒健康甚至致殘的一種常見疾病，嚴(yán)重影響兒童生活質(zhì)量，但迄今為止尚無理想的治療方法。目前普遍認(rèn)為早期干預(yù)有助于腦損傷康復(fù)，其中環(huán)境干預(yù)占有相當(dāng)重要的地位。環(huán)境刺激可影響腦的形態(tài)和功能，增強(qiáng)神經(jīng)系統(tǒng)的可塑性，提高學(xué)習(xí)記憶功能，對(duì)腦發(fā)育具有重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)早期環(huán)境干預(yù)后HIBD大鼠腦組織NFP的含量、海馬區(qū)存活神經(jīng)元數(shù)及超微結(jié)

2、構(gòu)改變，探討早期早期環(huán)境干預(yù)對(duì)于促進(jìn)缺血缺氧的腦組織恢復(fù)及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)重建的可能機(jī)制，旨在為臨床應(yīng)用豐富環(huán)境治療新生兒HIBD提供基礎(chǔ)理論支持和指導(dǎo)。 方法：7日齡(postnatalday7，P7)Sprague-Dawley(SD)新生大鼠，采用Rice法建立HIBD模型，隨機(jī)分為三組：正常組、非干預(yù)組及干預(yù)組，于建模后24h進(jìn)行早期撫觸和豐富環(huán)境干預(yù)，干預(yù)28d后，應(yīng)用Morris水迷宮測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶能力，測(cè)量體重，HE染色

3、觀察海馬病理形態(tài)學(xué)改變，尼氏染色計(jì)數(shù)海馬區(qū)存活神經(jīng)元數(shù)目，免疫組織化學(xué)法檢測(cè)左側(cè)與右側(cè)腦組織海馬神經(jīng)絲蛋白(neurofilamentprotein，NFP)積分光密度值之比(L:RNF)，透射電鏡觀察海馬超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)果： 1.在Morris水迷宮的定位航行和空間探索實(shí)驗(yàn)中，干預(yù)組成績(jī)明顯優(yōu)于非干預(yù)組(P＜0.001)，與正常組差異不明顯(P＞0.05)。 2.在體重上，干預(yù)組明顯高于非干預(yù)組(P＜0.05

4、)，與正常組差異不明顯(P＞0.05)。 3.HE染色見干預(yù)組患側(cè)海馬輕度異常，如神經(jīng)元排列稍紊亂、少量細(xì)胞丟失等；非干預(yù)組左側(cè)海馬明顯異常，細(xì)胞層數(shù)減少，神經(jīng)元排列散亂、稀疏，細(xì)胞間隙增大，脫失明顯，核仁不清，可見核固縮、核碎裂；正常組患側(cè)海馬無異常。 4.神經(jīng)元尼氏染色計(jì)數(shù)顯示，干預(yù)組患側(cè)海馬神經(jīng)元存活數(shù)目多于非干預(yù)組(P＜0.001)，與正常組差異不明顯(P＞0.05)。 5.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，干預(yù)

5、組左側(cè)海馬NFP表達(dá)強(qiáng)于非干預(yù)組(P＜0.01)，與正常組差異不明顯(P＞0.05)。 6.透射電鏡觀察左側(cè)海馬區(qū)，非干預(yù)組海馬神經(jīng)細(xì)胞固縮改變，線粒體腫脹，神經(jīng)絲數(shù)量減少，排列稀疏，突觸數(shù)量減少，突觸間隙增寬，突觸囊泡減少，突觸后致密物變薄。干預(yù)組海馬神經(jīng)元和突觸無明顯病理改變。 結(jié)論： 1.HIBD新生鼠患側(cè)腦組織NFP表達(dá)下降，海馬區(qū)神經(jīng)元數(shù)減少，反映新生鼠腦灰質(zhì)及腦白質(zhì)均對(duì)缺氧缺血損害敏感。 2.