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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:
臨床背景:新生兒缺氧缺血性腦損傷(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是指各種圍產(chǎn)期窒息引起的部分或完全缺氧、腦血流減少或暫停導(dǎo)致胎兒或新生兒腦損傷。目前臨床上主要治療方法是對(duì)癥支持治療,尚缺乏有效療法。
科研背景:相對(duì)于低氧預(yù)處理(Hypoxic preconditioning,HPreC)而言,低氧后處理(Hypoxic postconditioning,HPostC)是
2、指在機(jī)體損傷后給予適度的低氧干預(yù),誘導(dǎo)組織代償性修復(fù)。其主要作用機(jī)制是誘導(dǎo)低氧誘導(dǎo)因子1a(Hypoxia-inducible factor 1alpha,HIF-1a)的表達(dá)和促進(jìn)神經(jīng)干細(xì)胞增殖及抑制氧自由基的生成等。HPostC可部分替代一些實(shí)驗(yàn)顯示有效治療新生兒HIBD的方法。
國(guó)內(nèi)外最新研究:2003年趙志青等首次研究HPostC體內(nèi)干預(yù)心肌細(xì)胞的作用,實(shí)驗(yàn)顯示HPostC能修復(fù)損傷的心肌細(xì)胞,但因體內(nèi)干預(yù)是有創(chuàng)性操作
3、而較難應(yīng)用于臨床。2008年P(guān)ignataro等研究HPostC體外干預(yù)腦損傷成年鼠的作用,實(shí)驗(yàn)顯示HPostC能修復(fù)成年鼠腦損傷,目前少有報(bào)道HPostC體外干預(yù)HIBD新生鼠的作用。
根據(jù)干預(yù)時(shí)間及周期不同,實(shí)驗(yàn)分二部分研究HPostC體外干預(yù)HIBD新生鼠的作用。
第一部分實(shí)驗(yàn):單次低氧后處理體外干預(yù)HIBD新生鼠的作用
目的:
研究單次低氧后處理(Einmal hypoxic postco
4、nditioning; EHPC)體外干預(yù)HIBD新生鼠時(shí)HIF-1a表達(dá)和HIBD幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力及情緒反應(yīng)。
方法:
將204只7日齡SD新生鼠隨機(jī)分成四組(每組51只),假手術(shù)組、HIBD組、15%02+85%N2組及8%02+92%N2組。各組造模后放置缺氧艙中,分別充入21%02、21%02、15%02、8%02氧氮混合氣體1L/min,干預(yù)5min,頻率1次/天,周期1天。每組再隨機(jī)分2個(gè)亞組行免疫組化檢
5、測(cè)(n=6,海馬齒狀回HIF-1a表達(dá))和神經(jīng)行為檢測(cè)(n=45,跳臺(tái)試驗(yàn)、曠場(chǎng)試驗(yàn)及高架十字迷宮試驗(yàn)各15只)。
結(jié)果:
1.8%02+92%N2組HIF-1a表達(dá)量最高且與其它三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),假手術(shù)組HIF-1a表達(dá)量最低(P<0.05),而HIBD組與15%02+85%N2組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
2.跳臺(tái)試驗(yàn)示假手術(shù)組于學(xué)習(xí)潛伏期、記憶潛伏期、學(xué)習(xí)錯(cuò)誤次數(shù)及記憶
6、錯(cuò)誤次數(shù)中的均數(shù)最小且與其它三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其它三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。
3.曠場(chǎng)試驗(yàn)示假手術(shù)組于周?chē)鷧^(qū)距離、中央?yún)^(qū)距離、總距離和進(jìn)入中央?yún)^(qū)次數(shù)中均數(shù)最小且與其它三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其它三組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。
4.高架十字迷宮試驗(yàn)示假手術(shù)組于閉臂距離、開(kāi)放臂距離、總距離和進(jìn)入開(kāi)放臂次數(shù)的均數(shù)最小且與與其它三組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其
7、它三組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。
結(jié)論:
EHPC體外干預(yù)能促進(jìn)HIBD新生鼠海馬齒狀回HIF-1a表達(dá),但不能提高HIBD幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力,也不能改善HIBD幼鼠情緒反應(yīng)。
第二部分實(shí)驗(yàn):間歇性低氧后處理體外干預(yù)HIBD新生鼠的作用
目的:
研究間歇性低氧后處理(Intermittent hypoxic postconditioning,IHPC)體外干預(yù)HIBD新生鼠時(shí)HIF-
8、1a表達(dá)和HIBD幼鼠學(xué)習(xí)記憶能力及情緒反應(yīng)。
方法:
動(dòng)物模型制備、實(shí)驗(yàn)分組、樣本量、檢測(cè)指標(biāo)及檢驗(yàn)方法與第一部分實(shí)驗(yàn)相同,但各組干預(yù)時(shí)間為多日時(shí)程遞增方式,即第一天低氧干預(yù)5min,隨后每天遞增3min,頻率1次/天,周期7天。
結(jié)果:
1.HIF-1a:在四組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),8%02+92%N2組HIF-1a均數(shù)最大,15%02+85%N2組均數(shù)高于HIBD
9、組,假手術(shù)組均數(shù)最低。
2.跳臺(tái)試驗(yàn):學(xué)習(xí)潛伏期和記憶潛伏期在四組中兩兩比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),8%02+92%N2組均數(shù)小于15%02+85%N2組。學(xué)習(xí)錯(cuò)誤次數(shù)和記憶錯(cuò)誤次數(shù)在8%02+92%N2組與15%02+85%N2組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),而在假手術(shù)組與HIBD組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),假手術(shù)組的均數(shù)小于HIBD組。
3.曠場(chǎng)試驗(yàn):曠場(chǎng)試驗(yàn)各檢測(cè)項(xiàng)目在四組中兩兩
10、比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HIBD組各檢測(cè)項(xiàng)目中均數(shù)最高,15%02+85%N2組各檢測(cè)項(xiàng)目均數(shù)高于8%02+92%N2組,假手術(shù)組各項(xiàng)目均數(shù)最低。
4.高架十字迷宮試驗(yàn):封閉臂距離、開(kāi)放臂距離及總距離在四組之間兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HIBD組各均數(shù)最大,15%02+85%N2組各均數(shù)大于8%02+92%N2組,假手術(shù)組各均數(shù)最小。開(kāi)放臂次數(shù)在HIBD組、15%02+85%N2組及8%02
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