四種中藥對(duì)小鼠細(xì)胞環(huán)加氧酶基因及EP4受體基因表達(dá)的影響.pdf

1、非甾類抗炎藥(NSAIDs)通過對(duì)動(dòng)物體內(nèi)前列腺素生成的限速酶環(huán)加氧酶活性的抑制,起消炎止痛和抗癌作用.本論文以小鼠RAW264.7細(xì)胞株為試驗(yàn)材料,應(yīng)用RT-PCR技術(shù),研究了4種中藥(人參皂甙Rb<,1>、Re和Rg<,1>和隱丹參酮)對(duì)環(huán)加氧酶(cyclooxygenase,COX)及其催化產(chǎn)物PGE<,2>(prostaglandin E<,2>)的受體EP4表達(dá)活性的影響,獲得了如下結(jié)果.1)通過脂多糖(LPS)刺激6小時(shí)誘導(dǎo)

2、小鼠RAW264.7細(xì)胞環(huán)加氧酶表達(dá)后,用人參皂甙Rb<,1>、Re和Rg<,1>和隱丹參酮分別刺激18個(gè)小時(shí),提取細(xì)胞總RNA進(jìn)行RT-PCR,除擴(kuò)增出COX-2 cDNA片斷外,還擴(kuò)增出一類新的未知序列的環(huán)加氧酶類物質(zhì)COX-3.Rb<,1>特異性抑制該基因的表達(dá)活性,而人參皂甙Re和Rg<,1>和隱丹參酮?jiǎng)t對(duì)COX-3不起作用.上述4種藥物對(duì)COX-2的表達(dá)均不產(chǎn)生影響.2)換用新的引物進(jìn)行定量RT-PCR,同時(shí)擴(kuò)增EP4受體和β

3、-actin的cDNA片斷,發(fā)現(xiàn)隱丹參酮和Rg<,1>完全抑制EP4的表達(dá)活性,Rb<,1>和Re對(duì)EP4受體的活性抑制分別為62％和39％.再用相同濃度的Rb<,1>處理已經(jīng)由LPS刺激表達(dá)環(huán)加氧酶的細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)在最初的1小時(shí)內(nèi),Rb<,1>能促進(jìn)EP4的表達(dá),但從第2小時(shí)開始,EP4的表達(dá)量開始下降,該過程一直持續(xù)到大約第24小時(shí).3)人參皂甙Rb<,1>通過一類新的環(huán)加氧酶起作用,其作用機(jī)理與傳統(tǒng)的COX-2特異性抑制劑不同,它可能