醋酸鉛對小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡及凋亡基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、鉛廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)，包括采礦，精煉和制造鉛電池。雖然目前這種重金屬還沒得到廣泛的應(yīng)用，但它仍然是一個(gè)重要的環(huán)境安全問題。鉛廣泛存在于自然界中，進(jìn)入機(jī)體的鉛主要對機(jī)體血紅細(xì)胞、神經(jīng)系統(tǒng)以及腎臟產(chǎn)生毒害作用，但它也可對動(dòng)物的生殖系統(tǒng)產(chǎn)生毒害作用。大量的研究指出，高濃度的鉛可對雄性生殖系統(tǒng)產(chǎn)生毒害，包括對睪丸組織的損傷和對生精功能的影響。目前在鉛對雌性的生殖毒性方面尚少見到報(bào)道，只有少量的關(guān)于鉛中毒會引起女性不孕，流產(chǎn)，死胎等方面的報(bào)道，但

2、關(guān)于鉛對雌性動(dòng)物生殖毒性的作用機(jī)理至今尚未明確。本研究旨在探討鉛對雌性動(dòng)物生殖毒性的作用機(jī)制，為防止鉛中毒提供理論依據(jù)。 將120只20日齡的雌性昆明系小白鼠隨機(jī)分為低、中、高劑量醋酸鉛染毒組和空白對照組，每組30只。將小鼠稱重后，對染毒組分別以10，20，40mg·kg-1體重的醋酸鉛溶液進(jìn)行腹腔注射，1.0mL/只·d，對照組注射等體積生理鹽水，連續(xù)染毒2d。染毒結(jié)束后24h和72h，分兩批稱重后處死，分離小鼠卵巢進(jìn)行以下幾

3、方面的研究： 1.卵巢組織結(jié)構(gòu)的石蠟切片觀察。 2.Tunel法檢測卵巢顆粒細(xì)胞的凋亡率。 3.采用黃嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥（TBA）法檢測顆粒細(xì)胞的SOD活性和MDA含量。 4.RT-PCR方法檢測卵巢顆粒細(xì)胞中p53、Bax、Bcl-2凋亡基因的表達(dá)量。 試驗(yàn)結(jié)果顯示： 1.染毒各組小鼠在攻毒后體重均有所減輕，且隨著劑量的增加和時(shí)間的延長，體重減輕得越明顯。與對照組相比較，低劑量組染

4、毒后體重?zé)o明顯差異（p>0.05），中劑量組染毒前后體重差異顯著（p<0.05），高劑量組染毒前后體重差異極顯著（p<0.01）。 2.光鏡下，染毒組小鼠卵巢中的原始卵泡、閉鎖卵泡數(shù)目較多，而初級卵泡、次級卵泡和成熟卵泡數(shù)目明顯減少。卵巢組織結(jié)構(gòu)不完整，卵巢皮質(zhì)區(qū)變薄，部分卵泡破裂，出血，變形。卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞排列紊亂，缺乏卵母細(xì)胞。 3.染毒組中顆粒細(xì)胞的凋亡率均隨著染毒劑量的增加和時(shí)間的延長而升高，與對照組相比，差異極

5、顯著（p<0.01）。 4.隨著醋酸鉛劑量的增加，染毒時(shí)間的延長，顆粒細(xì)胞中SOD的活性逐漸減弱，而MDA含量逐漸增加，與對照組比較，差異極顯著（p<0.01）。 5.隨著醋酸鉛劑量的增加和作用時(shí)間的延長，凋亡基因p53、Bax表達(dá)量逐漸增加，而Bcl-2表達(dá)量卻逐漸下降。染毒組p53的基因表達(dá)量與對照組相比，差異極顯著（p<0.01）；染毒組Bax基因表達(dá)量與對照組相比較，低劑量組差異具有顯著性（p<0.05），中、高