鎘對(duì)小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、鎘是常見的環(huán)境和工業(yè)污染物，對(duì)雌性哺乳動(dòng)物生殖系統(tǒng)具有明顯的毒性。可引起卵巢病理組織學(xué)改變，干擾排卵和受精過程，引起暫時(shí)性不育，還可能對(duì)雌激素受體、孕酮受體及基因表達(dá)產(chǎn)生影響。 研究目的：探討鎘對(duì)卵巢顆粒細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用，闡明其作用機(jī)理；在理論上對(duì)鎘的性腺毒性作用給予補(bǔ)充，為今后的研究提供理論依據(jù)。 研究方法：本實(shí)驗(yàn)采用25日齡未成年雌性小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過孕馬血清促性腺激素處理后再腹腔注射氯化鎘的在體實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停捎貌?/p>

2、理學(xué)方法檢測(cè)卵巢中卵泡閉鎖的變化；用DNAladder的有無及TUNEL法來檢測(cè)卵巢顆粒細(xì)胞是否凋亡及凋亡率的變化；用免疫組化方法檢測(cè)顆粒細(xì)胞bcl-2、bax基因的表達(dá)；用亞硒酸鈉作為拮抗劑來探討硒對(duì)鎘毒性的拮抗作用。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：用瓊脂糖凝膠電泳法未能檢測(cè)到48h各組的DNA梯狀帶，96h僅高劑量組(4mg/kg·wb)有梯狀帶出現(xiàn)。TUNEL法檢測(cè)結(jié)果為：48h對(duì)照組凋亡率為0.6378％；高、中、低劑量組分別為13.887

3、1％、10.7573％、10.0208％；硒組為5.7232％。96h對(duì)照組凋亡率上升為11.0963％，高、中、低各組分別為20.3204％、12.2031％、12.2171％，硒組為14.9203％。表明各組均有不同程度的凋亡，且隨鎘劑量增加，凋亡率有上升趨勢(shì)，差異有極顯著性(P＜0.01)。病理學(xué)檢察卵巢切片中卵泡閉鎖情況，結(jié)果隨鎘劑量的增加，卵泡閉鎖率逐漸升高，差異有顯著性。免疫組化法檢測(cè)Bax和Bcl-2蛋白表達(dá)，結(jié)果Bax在