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1、目的:中藥復(fù)方抗癌散是臨床應(yīng)用多年的醫(yī)院制劑,研究及實(shí)踐證明抗癌散具有良好的抗腫瘤作用,臨床上可用于治療多種癌癥。研究發(fā)現(xiàn),抗癌散不但可以抑制腫瘤細(xì)胞增殖,并能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。但因其作用途徑十分復(fù)雜,機(jī)制至今仍不太明確。本課題主要研究抗癌散皂苷類成分對(duì)人肝癌Bel-7402細(xì)胞增殖的影響及其抗腫瘤作用機(jī)制。
方法:采用MTT比色分析法檢測(cè)抗癌散皂苷類成分對(duì)肝癌細(xì)胞Bel-7402和人正常肝細(xì)胞L02增殖的影響;用PI流式細(xì)胞
2、術(shù)研究抗癌散皂苷類成分誘導(dǎo)Bel-7402細(xì)胞凋亡作用;免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)抗癌散皂苷類成分處理后Bel-7402細(xì)胞Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá),Western blot法測(cè)定抗癌散處理后Bel-7402細(xì)胞Bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:抗癌散皂苷類成分顯著抑制人肝癌Bel-7402細(xì)胞的生長(zhǎng),且呈濃度和時(shí)間依賴性,但其卻不引起人正常肝細(xì)胞LO2的存活率的下降;流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明同一濃度抗癌散皂苷類成分(44μg/
3、ml)處理Bel-7402細(xì)胞24h、48h后,亞G1期細(xì)胞累積均逐漸增加;免疫細(xì)胞化學(xué)法結(jié)果表明抗癌散皂苷類成分(44μg/ml)處理Bel-7402細(xì)胞24h、48h、72h后,Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào),Bax蛋白表達(dá)上調(diào);Western blot結(jié)果表明抗癌散皂苷類成分(44μg/ml)處理細(xì)胞Bel-7402細(xì)胞24h、48h、72h后,Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào),Bax表達(dá)上調(diào)。
結(jié)論:抗癌散皂苷類成分具有誘導(dǎo)人肝癌Bel
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