局灶腦皮質(zhì)發(fā)育不良性癲癇K-Cl共轉(zhuǎn)體的表達(dá).pdf

1、研究背景：
　　癲癇是一組由大量神經(jīng)元反復(fù)發(fā)作的異常放電而引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)短暫性功能失常為特點(diǎn)的慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。據(jù)流行病學(xué)調(diào)查，一般人群的年患病率為5‰-7‰【1】。大多數(shù)的癲癇患者經(jīng)過一段時(shí)間的正規(guī)藥物治療，病情可以得到控制，但仍有大約三分之一的患者，藥物治療并不能減輕發(fā)作的頻率和強(qiáng)度，我國活動性癲癇患病率為4.6‰，我國估計(jì)難治性癲癇患者不少于100萬。對于難治性癲癇來說預(yù)后較差，反復(fù)的癲癇發(fā)作后常伴有智力障礙和神經(jīng)功

2、能缺損癥狀，其嚴(yán)重影響癲癇病人的身體健康和生活工作，常常需要外科治療。國內(nèi)外學(xué)者在對癲癇患者手術(shù)切除病灶的研究【2】，發(fā)現(xiàn)局灶腦皮質(zhì)發(fā)育不良發(fā)病率較高，平均發(fā)病率高達(dá)46.5％，其中嬰幼兒約為68%，兒童和成人為20%-30%，明顯高于正常人群的1.7%，局灶腦皮質(zhì)發(fā)育不良（FCD）病灶本身具有較高的致癇性。
　　局灶腦皮質(zhì)發(fā)育不良（focal cortical dysplasia）首先由Taylor1971年報(bào)道【3】，其特點(diǎn)是

3、腦皮質(zhì)的分層紊亂和大量發(fā)育異常神經(jīng)細(xì)胞，目前由Palmini等提出的分類標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)用較為廣泛。有學(xué)者對FCD癲癇患者手術(shù)切除病灶進(jìn)行電生理研究，發(fā)現(xiàn)其存在內(nèi)在的癲癇放電，γ-氨基丁酸GABAA受體的激活，介導(dǎo)的同步去極化電位，導(dǎo)致癲癇發(fā)作【4】。先前學(xué)者對癲癇病灶的研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)Cl濃度異常增高，GABAA反應(yīng)呈現(xiàn)興奮性，而矛盾成為致癲癇的原因【5】。在這兩種情下，破壞了細(xì)胞內(nèi)外離子平衡成為了FCD組織致癲癇性質(zhì)的關(guān)鍵因素。
　　KC

4、C2是中樞神經(jīng)系統(tǒng)特有的陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，在腦的大部分區(qū)域與內(nèi)環(huán)境的K+和Cl－轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)【6】，KCC2是電中性轉(zhuǎn)運(yùn)體，可雙向轉(zhuǎn)運(yùn)K+和Cl－，這取決于離子的濃度，正常情況下，KCC2把細(xì)胞內(nèi)Cl－轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞，降低細(xì)胞內(nèi)Cl－濃度，使得GABA呈現(xiàn)抑制性反應(yīng)【6】。有學(xué)者認(rèn)為，由于興奮性和抑制性突觸傳遞失去平衡，更傾向于興奮，導(dǎo)致癲癇放電。GABA是主要的神經(jīng)抑制性遞質(zhì)，局部GABA活性減弱是局灶癲癇的基礎(chǔ)，在人類FCD組織存在神經(jīng)元興奮

5、性增加和自發(fā)性癲癇樣放電【7】.因細(xì)胞內(nèi)的高Cl－導(dǎo)致GABA興奮性去極化不僅存在于早期的發(fā)育階段還存在于各種病理狀態(tài)【8】。陽離子-氯化物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Cl－起關(guān)鍵性作用【9】。因此，要研究FCD性癲癇的病理生理，了解FCD病灶中KCC2的分布很有意義。本實(shí)驗(yàn)用免疫組化的方法了解KCC2在難治性癲癇患者手術(shù)切除病灶中的分布情況。
　　研究目的：
　　了解人類腦局灶性腦皮質(zhì)發(fā)育不良（FCD）癲癇患者手術(shù)切除病灶中K-C

6、l共轉(zhuǎn)體（KCC2）的表達(dá)分布。
　　研究方法：
　　運(yùn)用免疫組化染色方法，對23例FCD癲癇患者手術(shù)切除病灶及6例正常腦組織進(jìn)行免疫染色，了解KCC2的表達(dá)分布，其中FCDⅠB型5例，F(xiàn)CDⅡA型9例，F(xiàn)CDⅡB型9例。
　　研究結(jié)果：
　　對照組6例發(fā)育成熟的正常腦組織觀測到KCC2彌漫分布于神經(jīng)纖維，一致朝向皮層蛛網(wǎng)膜方向，包體染染色較少，皮層下異位神經(jīng)元胞漿呈現(xiàn)濃密染色，白質(zhì)無明顯KCC2染色；FCDⅠB

7、型腦皮層可見神經(jīng)纖維染色，神經(jīng)元排列極性紊亂，包體染色少，未發(fā)育成熟神經(jīng)元可見胞漿染色，畸形巨大的神經(jīng)元錐體細(xì)胞染色較少，皮層下異位神經(jīng)元增多，呈現(xiàn)胞漿染色。FCDⅡ型腦皮層，神經(jīng)元極性紊亂，形態(tài)異常神經(jīng)元呈現(xiàn)胞漿濃密染色，周圍神經(jīng)纖維染色減弱，周圍小神經(jīng)元也呈現(xiàn)濃密染色，氣球樣細(xì)胞無KCC2染色。
　　結(jié)論：
　　FCD組織神經(jīng)元表達(dá)KCC2，但細(xì)胞亞單位分布改變，從而改變了Cl-和K+的離子內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，導(dǎo)致了FCD的癲