S100A6與胃癌細(xì)胞株SGC7901多藥耐藥的相關(guān)性研究.pdf

1、大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文S100A6與胃癌細(xì)胞株SGC7901多藥耐藥的相關(guān)性研究姓名：李暉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：關(guān)宏偉20090601M a x V i s i o n l M 快捷免疫組化兩步法初步觀察S 1 0 0 A 6 分別在S G C 7 9 0 1 及S G C 7 9 0 1 ／A D R 細(xì)胞中的表達(dá)水平的差異；依據(jù)全蛋白提取試劑盒說明書化學(xué)裂解法提取S G C 7 9 0 1 和S G

2、C 7 9 0 1 ／A D R 細(xì)胞總蛋白，R N A 提取試劑提取兩種細(xì)胞總R N A ，用W e s t e r n ．b l o t 和半定量R T - P C R 技術(shù)分別從蛋白質(zhì)水平和R N A 水平對S 10 0 A 6 在S G C 7 9 0 1 和S G C 7 9 0 1 ／A D R 細(xì)胞中的表達(dá)水平進(jìn)行檢測和分析，從而驗(yàn)證了比較蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果，同時(shí)進(jìn)一步探討S 10 0 A 6 與胃癌多藥耐藥的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3、：免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測發(fā)現(xiàn)，S 10 0 A 6 在S G C 7 9 0 l 細(xì)胞中呈高表達(dá)，染色為強(qiáng)陽性( + + + ) ，胞漿深染呈棕黃色．棕褐色：S G C 7 9 0 1 ／A D R 細(xì)胞中S 10 0 A 6 表達(dá)量明顯降低，染色為弱陽性( + ) ，胞漿染成淡黃色：W e s t e r n ．b l o t 結(jié)果：提取兩種細(xì)胞全蛋白經(jīng)S D S ．P A G E電泳，W e s t e r n ．b l o t 免疫印

4、跡分析，發(fā)現(xiàn)，S 1 0 0 A 6 在S G C 7 9 0 l 細(xì)胞中高表達(dá)，在S G C 7 9 0 1 ／A D R 細(xì)胞中低表達(dá)，轉(zhuǎn)膜后的蛋白條帶經(jīng)B a n d S c a n 5 ．0條帶分析軟件測得其灰度值分別為，S G C 7 9 0 1 細(xì)胞S 10 0 A 6 I O DX ：1 1 0 ．2 3 6 ，S G C 7 9 0 l ／A D R 細(xì)胞S 1 0 0 A 6I O DX ：6 2 ．7 0 1 ，以B

5、 ．a(chǎn) c t i n 為內(nèi)標(biāo)校正蛋白，重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)測得S 1 0 0 A 6 在S G C 7 9 0 1 中的平均表達(dá)量為4 ．3 5 6 ±O ．7 5 9 ，在S G C 7 9 0 1 ／A D R 中的平均表達(dá)量為2 ．2 4 3 ±O ．0 8 9 ，以均值作兩獨(dú)立樣本的t 檢驗(yàn)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P = 0 ．0 3 9 ，P0 ．0 5 ，差異不具有顯著性。結(jié)論：1 ．S 10 0 A 6 蛋白在人胃癌

6、細(xì)胞S G C 7 9 0 1 及其耐藥細(xì)胞S G C 7 9 0 1 ／A D R 中存在差異性表達(dá)，在S G C 7 9 0 l 細(xì)胞中呈高表達(dá)，在耐藥S G C 7 9 0 l ／A D R 細(xì)胞中呈低表達(dá)：2 ．S 10 0 A 6 的m R N A 在S G C 7 9 0 1 細(xì)胞及其耐藥細(xì)胞S G C 7 9 0 1 ／A D R中無差異表達(dá)，其蛋白在S G C 7 9 0 1 細(xì)胞及其耐藥細(xì)胞S G C 7 9 0 l