抑癌蛋白UBIAD1的細胞亞定位以及它與H-Ras、ApoE的相互作用的研究.pdf

1、移行上皮反應(yīng)基因TERE1(Transitional epithelial response gene 1)是由TerenceW.McGarvey等人于2001年首次發(fā)現(xiàn)并克隆的,因其含有一個UBiA類異戊烯基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域(UbiA prenyltransferase domain containing 1),所以也被人們稱為UBIAD1。UBIAD1基因能夠在人體各類組織中廣泛表達,其開放閱讀框能夠編碼一個8-10次跨膜的膜蛋白,該膜

2、蛋白含有338個氨基酸,分子量為36.8KD。UBIAD1基因與人類的很多疾病有關(guān)系,例如轉(zhuǎn)移細胞癌、施耐德結(jié)晶狀角膜營養(yǎng)不良癥和帕金森癥。但是,至今關(guān)于UBIAD1蛋白如何在這些疾病中發(fā)揮作用的仍不清楚,這可能是由于國際上對該蛋白細胞內(nèi)亞定位沒有達成一致的認識。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)UBIAD1蛋白能夠定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體細胞器上,在細胞質(zhì)膜上定位不明顯。而且將高爾基體從L02細胞中分離出來發(fā)現(xiàn)高爾基提取物中富含UBIAD1蛋白。確定了

3、UBIAD1蛋白在細胞內(nèi)的亞定位后,我們對它的功能進行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)UBIAD1蛋白、H-Ras蛋白和ApoE蛋白三者在高爾基體上共定位,而且熒光共振能量轉(zhuǎn)移實驗發(fā)現(xiàn)他們?nèi)邇蓛芍g能夠發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。免疫共沉淀實驗發(fā)現(xiàn)UBIAD1蛋白和ApoE蛋白可以相互作用,而且UBIAD1蛋白和H-Ras蛋白也可以相互作用,表明UBIAD1,H-Ras和ApoE在高爾基體上形成一個蛋白質(zhì)復(fù)合體。而且我們將ApoE基因轉(zhuǎn)染到T24細胞后