質(zhì)譜法探究UBIAD1蛋白對HRAS蛋白的修飾.pdf

1、UBIAD1編碼含有338個氨基酸，組成分子量為36.8kd的膜蛋白。UBIAD1與人類的多種疾病有相關(guān)，例如癌癥、施耐德結(jié)晶狀角膜營養(yǎng)不良癥、心血管疾病和帕金森等癥。基于以前的研究，發(fā)現(xiàn)UBIAD1蛋白會和HRAS蛋白相互作用，且UBIAD1蛋白可以引起T24細(xì)胞的凋亡，但是，至今關(guān)于UBIAD1蛋白如何引起細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制尚未研究清楚，推測UBIAD1蛋白會對HRAS蛋白有修飾的作用。
　　應(yīng)用液質(zhì)聯(lián)用電噴霧質(zhì)譜儀，對來自實(shí)

2、驗(yàn)設(shè)計(jì)中不同樣品純化后的HRAS蛋白，酶解處理進(jìn)行質(zhì)譜分析。分析結(jié)果顯示成功的鑒定出了HRAS蛋白。大腸桿菌原核表達(dá)的HRAS蛋白可以作為空白參照，酶解多肽不含任何翻譯后修飾。同時，對比了UBIAD1蛋白敲低組和正常組后發(fā)現(xiàn)，敲低組的F-CVLS（M/Z=625.6）含量明顯多于正常組，這表明CVLS(M/Z=421.5)可能通過UBIAD1蛋白的修飾轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌问降亩嚯男蛄?。此外，病變組T24細(xì)胞中純化的HRAS蛋白也同樣得到這一結(jié)論