質(zhì)譜法探究UBIAD1蛋白對(duì)HRAS蛋白的修飾.pdf_第1頁(yè)
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1、UBIAD1編碼含有338個(gè)氨基酸,組成分子量為36.8kd的膜蛋白。UBIAD1與人類的多種疾病有相關(guān),例如癌癥、施耐德結(jié)晶狀角膜營(yíng)養(yǎng)不良癥、心血管疾病和帕金森等癥?;谝郧暗难芯?,發(fā)現(xiàn)UBIAD1蛋白會(huì)和HRAS蛋白相互作用,且UBIAD1蛋白可以引起T24細(xì)胞的凋亡,但是,至今關(guān)于UBIAD1蛋白如何引起細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制尚未研究清楚,推測(cè)UBIAD1蛋白會(huì)對(duì)HRAS蛋白有修飾的作用。
  應(yīng)用液質(zhì)聯(lián)用電噴霧質(zhì)譜儀,對(duì)來(lái)自實(shí)

2、驗(yàn)設(shè)計(jì)中不同樣品純化后的HRAS蛋白,酶解處理進(jìn)行質(zhì)譜分析。分析結(jié)果顯示成功的鑒定出了HRAS蛋白。大腸桿菌原核表達(dá)的HRAS蛋白可以作為空白參照,酶解多肽不含任何翻譯后修飾。同時(shí),對(duì)比了UBIAD1蛋白敲低組和正常組后發(fā)現(xiàn),敲低組的F-CVLS(M/Z=625.6)含量明顯多于正常組,這表明CVLS(M/Z=421.5)可能通過(guò)UBIAD1蛋白的修飾轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌问降亩嚯男蛄?。此外,病變組T24細(xì)胞中純化的HRAS蛋白也同樣得到這一結(jié)論

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