增生細(xì)胞核抗原在亞急性或慢性皮炎表皮增生模型中的表達(dá).pdf

1、目的：皮膚的屏障功能對(duì)角質(zhì)細(xì)胞DNA的合成具有調(diào)節(jié)作用，在急性動(dòng)物模型中，當(dāng)屏障功能降低時(shí)，表皮細(xì)胞DNA的合成增加，其增加的程度與屏障功能異常的程度成正比，當(dāng)屏障功能改善后，由屏障功能異常所誘導(dǎo)的DNA的合成受到相應(yīng)的抑制。亞急性及慢性皮炎的主要病理改變是表皮增生過(guò)度；生理改變是表皮屏障功能降低，但亞急性及慢性皮炎表皮增生過(guò)度與屏障功能改變的相關(guān)性，目前尚無(wú)此方面的研究。本實(shí)驗(yàn)的目的是分別以0.5﹪2，4二硝基氟苯(DNFB)及0.0

2、1﹪佛波酯(TPA)造亞急性及慢性皮炎的動(dòng)物模型，并通過(guò)加用非通透性的膜覆蓋及涂擦保濕劑硅油來(lái)改善表皮屏障功能，以普通組織病理及增生細(xì)胞核抗原(PCNA)的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)表皮增生是否改變，進(jìn)而推斷表皮屏障功能改變是否與亞急性或慢性皮炎的表皮增生有關(guān)。 方法：將小鼠隨機(jī)分成A、B、C三組，每組分為1、2、3小組，其中A組乙醇組，B組2，4二硝基氟苯組(DNFB)、C組佛波酯組(TPA)：1設(shè)為基質(zhì)組，2設(shè)為保鮮膜組，3設(shè)為硅油組，分別

3、計(jì)為A1、A2、A3；B1、B2、B3；C1、C2、C3。A1組(乙醇基質(zhì)組)為單純外搽90﹪乙醇，A2組(乙醇保鮮膜組)為外搽90﹪乙醇后加用保鮮膜覆蓋，A3組(乙醇硅油組)為外搽90﹪乙醇后涂擦硅油； B1組(DNFB基質(zhì)組)為單純外搽0.5﹪DNFB，B2組為(DNFB保鮮膜組)為外搽0.5﹪DNFB后加用保鮮膜覆蓋，B3組(DNFB硅油組)為外搽0.5﹪DNFB后涂擦硅油；C1組(TPA基質(zhì)組)為單純外搽0.01﹪ TPA，C2

4、組(TPA保鮮膜組)為外搽0.01﹪TPA后加用保鮮膜覆蓋，C3(TPA硅油組)為外搽0.01﹪TPA后涂擦硅油。各組經(jīng)除毛后，第1天及第2天每日僅在B組的腹、背部涂擦1次，每次70微升，自第7天開始，每組均用相應(yīng)的制劑治療，每隔2日一次，每次70微升，加用保鮮膜組在涂相應(yīng)制劑30分鐘后于涂藥區(qū)加蓋保鮮膜，涂擦硅油組在涂相應(yīng)制劑30分鐘后于涂藥區(qū)涂擦硅油，每日2次，造膜期為25天。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，于各組動(dòng)物的腹、背部取小鼠皮膚活檢，分別做普

5、通病理(HE染色)及PCNA的免疫組化染色，在顯微鏡相同放大倍數(shù)下，測(cè)量各組表皮的厚度，計(jì)算均值；觀察表皮細(xì)胞PCNA的染色，計(jì)數(shù)表皮PCNA陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率，并計(jì)算均值，分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大體觀察顯示乙醇各組動(dòng)物皮膚無(wú)潮紅、增厚：DNFB各組動(dòng)物皮膚輕度潮紅、粗糙、增厚，個(gè)別部位稍有滲出、結(jié)痂，呈亞急性皮炎表現(xiàn)；TPA各組動(dòng)物皮膚輕度潮紅、表皮干燥、增厚，呈慢性皮炎表現(xiàn)。 組織病理顯示乙醇各組

6、未見(jiàn)表皮增厚，未見(jiàn)真皮內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且各組PCNA陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)僅限于基底細(xì)胞層；DNFB各組及TPA各組表皮明顯增厚，真皮內(nèi)較多量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，DNFB組及TPA組的PCNA陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)分布于表皮的中下層包括基底細(xì)胞層和棘細(xì)胞層，其表達(dá)數(shù)量及表達(dá)厚度較乙醇各組均明顯增加。DNFB基質(zhì)組、TPA基質(zhì)組分別比較乙醇基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率均在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異，P<0.05，亞急性皮炎、慢性皮炎表皮增生模型成功。

7、 DNFB保鮮膜組較DNFB基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)；DNFB硅油組較DNFB基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上亦未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)。 TPA保鮮膜組較TPA．基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)；TPA硅油組較TPA基質(zhì)組其表皮增生厚度及PCNA陽(yáng)性標(biāo)記率在統(tǒng)計(jì)學(xué)上亦未見(jiàn)顯著性差異(P>0.05)。