谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白在內(nèi)毒素休克血管低反應(yīng)性中的作用及可能機(jī)制.pdf

1、第一章谷氨酰胺對(duì)正常大鼠熱休克蛋白70 mRNA表達(dá)的影響目的：觀察谷氨酰胺(Glutamine，Gln)是否能夠誘導(dǎo)熱休克蛋白70mRNA的表達(dá)。 方法：1)24只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為4組(每組n=6)，Ⅰ組，靜脈注射生理鹽水；Ⅱ組，靜脈注射Gln．0.15 g·kg<'-1>Ⅲ組，靜脈注射Gln．0.45 g·kg<'-1>：Ⅳ組，靜脈注射Gln.0.75g.kg<'-1>。各組大鼠于4h后處死，留取心、肝、肺和主動(dòng)脈，

2、用RT-PCR法測(cè)定HSP70mRNA的表達(dá)。2)30只健康雄性SD大鼠靜脈注射Gln.0.75 g·kg<'-1>后隨機(jī)分為5組(每組n=6)，分別在1h(1h組)、6h(6h組)、12h(12h組)、24h(24h組)和48h(48h組)處死，留取心、肝、肺和主動(dòng)脈，用RT-PCR法測(cè)定HSPTOmRNA的表達(dá)。 結(jié)果：1)各臟器組織中，Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組HSP70mRNA的表達(dá)均高于I組(P<0.05)，Gln劑量依賴性導(dǎo)致HS

3、P70mRNA的表達(dá)增高(P<0.05)：2)1h組、6h組和12h組HSP70的mRNA表達(dá)均高于24h組和48h組(P<0.05)。 結(jié)論：Gln能夠時(shí)間和劑量依賴性誘導(dǎo)大鼠HSPTO的mRNA表達(dá)，并且1-12h為表達(dá)高峰期。 第二章谷氨酰胺誘導(dǎo)熱休克蛋白表達(dá)對(duì)內(nèi)毒素休克大鼠血管反應(yīng)性的影響目的觀察注射谷氨酰胺(Glutamine，Gln)誘導(dǎo)熱休克蛋白(heat shock protein，HSP)表達(dá)對(duì)內(nèi)毒素休

4、克大鼠血管反應(yīng)性的影響。 方法 24只健康雄性SD大鼠，隨機(jī)分成空白對(duì)照組(n=8)：LPS休克組(LPS[Sigma]10 mg·kg<'-1>iv，n=8)：谷氨酰胺(Gln)治療組(LPS注射前1h靜脈注射Gln 0.75 g·kg<'-1>，n=8)?？瞻讓?duì)照組及注射LPS 6 h后各組動(dòng)物靜注去氧腎上腺素(PE，0.5-2.5 μg·kg<'-1>)，記錄注藥后MAP的增加百分比。所有in vivo實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，取大鼠胸

5、主動(dòng)脈環(huán)做離體張力實(shí)驗(yàn)，建立PE的劑量一反應(yīng)曲線并計(jì)算相應(yīng)的Emax、EC<,50>值。注射LPS后在90 min、360 min測(cè)定血清TNF-α、I-6和血漿MDA含量。注射LPS后6 h，留取心臟和主動(dòng)脈，用免疫組化法測(cè)HSP70的表達(dá)。結(jié)果：靜脈注射PE后，L,PS休克組動(dòng)物MAP的平均增長(zhǎng)率與對(duì)照組相比顯著降低至51.4﹪(P<0.05)：而Gln治療組MAP對(duì)PE反應(yīng)的增長(zhǎng)率較之LPS休克組增高了17.5﹪(P<0.05)。

6、LPS休克組大鼠胸主動(dòng)脈環(huán)對(duì)PE的反應(yīng)(Emax，0.94 g±0.01g；EC<,50>，13.49 nmol/L±0.06 nmol/L)與對(duì)照組相比有顯著差異(Emax，1.88 g±0.04 g：EC<,50>，8.55 nmol/L±0.08 nmol/L，P<0.05)，Gln治療組動(dòng)脈血管的血管反應(yīng)性有顯著改善(p<0.05)。三組動(dòng)物的心臟、主動(dòng)脈中均有HSP70的表達(dá)，但Gln組的表達(dá)量較L,PS休克組顯著增加(P<0