活化小腦皮層NMDA受體對(duì)浦肯野細(xì)胞自發(fā)性活動(dòng)的影響.pdf

1、目的：N-甲基（酰）-D-門(mén)冬氨酸（NMDA）受體是谷氨酸類門(mén)控通道，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的突觸傳遞調(diào)節(jié)方面起關(guān)鍵作用，廣泛存在于哺乳動(dòng)物小腦皮質(zhì)顆粒細(xì)胞、平行纖維、高爾基細(xì)胞以及分子層中間神經(jīng)元的細(xì)胞膜上，但哺乳動(dòng)物出生2周后小腦浦肯野細(xì)胞上的功能性NMDA受體的表達(dá)就會(huì)消失。迄今，NMDA受體在活體動(dòng)物上、在完整小腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中的作用還不完全清楚。因此，本課題應(yīng)用電生理和藥理學(xué)等手段，研究外源性NMDA對(duì)烏拉坦麻醉小鼠小腦浦肯野細(xì)胞（Pur

2、kinje cell，PC）自發(fā)性活動(dòng)的影響，探索NMDA對(duì)小腦神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)活動(dòng)的影響及其機(jī)制。
　　材料與方法：ICR小鼠（6-8周齡）經(jīng)腹腔注射烏拉坦(1.3g/kg體重.)麻醉后，在小腦Vermis VIa/VIb相應(yīng)部位行直徑為1-1.5mm的開(kāi)顱術(shù)，除去硬腦膜，腦表面暴露部位持續(xù)灌流人工腦脊液（ACSF）；與電生理記錄同步；電生理記錄選用細(xì)胞外記錄，電生理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析采用Clampfit10.1軟件，采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，給藥前后均數(shù)的比較采用配對(duì)T檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　?。?）腦表面灌流NMDA對(duì)小腦皮層 PC自發(fā)性單純性放電（simple spike，SS）活動(dòng)產(chǎn)生可逆性的抑制作用，其抑制效應(yīng)具有劑量依存性，半數(shù)抑制濃度為50.3μM。
　?。?）NMDA腦表面灌流濃度為25μM時(shí)可引起顯著抑制，給藥10分鐘后PC自發(fā)性SS放電頻率降低8.9±2.3％，沖洗后恢復(fù)。
　?。?）當(dāng)NMD

4、A的濃度增加至50μM，PC自發(fā)性SS放電頻率可減少53.3±3.5%；但對(duì)自發(fā)性SS放電的幅值和寬度沒(méi)有顯著性影響。
　　（4）高濃度NMDA可導(dǎo)致PC自發(fā)性SS放電停止，雖然對(duì)自發(fā)性復(fù)雜性放電頻率沒(méi)有顯著性影響，但可以顯著增加復(fù)雜性放電強(qiáng)度。
　　（5）GABAA受體阻斷劑不僅可以解除NMDA對(duì)PC自發(fā)性SS放電的抑制作用，而且揭示了外源性NMDA可以間接興奮PC，增加自發(fā)性SS放電頻率。
　　結(jié)論：外源性NMDA