驚厥損傷對發(fā)育期大鼠大腦皮層神經細胞糖皮質激素受體表達的影響.pdf

1、目的:研究圍生期驚厥損傷對發(fā)育中大鼠大腦皮層神經細胞糖皮質激素受體( glucocorticoid receptor, GR)表達的影響。
　　 方法:將48只生后(postnatal，PN)7d的Sprague-Dawley大鼠隨機分成驚厥組和對照組，驚厥組每日吸入三氟乙醚誘導驚厥發(fā)作1次，每次持續(xù)30min，連續(xù)6d;對照組同樣操作但不吸入三氟乙醚。分別于生后(postnatal，PN)第13d、19d和2m每組各處死8只大

2、鼠，用免疫組織化學法觀察大鼠大腦皮層GR表達的變化。
　　 以原代培養(yǎng)的大鼠大腦皮層神經元無鎂誘導的反復驚厥樣放電為模型，根據對體外原代培養(yǎng)6天皮層神經元的不同處理分為正常細胞外液組和無鎂細胞外液組。神經元在上述2種液體中孵育3小時，然后恢復正常DMEM培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，在無鎂損害后1、7及12天時應用免疫細胞化學技術及實時熒光定量PCR測定發(fā)育中大鼠皮層神經元無鎂細胞外液處理后GR表達的變化。
　　 結果:與對照組相比較

3、，在PN-13d時，驚厥組大鼠頂葉區(qū)GR免疫化學累計光密度(AOD)明顯低于正常對照組(P<0.05)，而在PN-19d和PN-2m時，驚厥組大鼠額葉、頂葉、顳葉區(qū)GR免疫化學AOD均明顯低于正常對照組(P<0.05)。體外培養(yǎng)的皮層神經元發(fā)現無鎂損傷后12d驚厥組GR蛋白免疫化學累積光密度較對照組顯著下降(P<0.O1)；而應用實時定量PCR發(fā)現，無鎂損傷后ld、7d驚厥組mRNA表達較對照組顯著增高(P<0.05)。