miR-206抑制乳腺癌MDA-MB-231細胞Cdc42蛋白的表達和對細胞骨架的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景與目的:microRNA是一種長度只有19～30個核苷酸非編碼RNA,能與mRNA3’非編碼區(qū)結(jié)合降解mRNA或抑制翻譯過程,從而起到負調(diào)控的作用。研究發(fā)現(xiàn),microRNA對許多疾病的發(fā)生、發(fā)展過程都有調(diào)節(jié)作用,包括腫瘤。本研究擬探討miR-206對MDA-MB-231乳腺癌細胞Cdc42蛋白表達的調(diào)控及對細胞骨架和細胞侵襲、遷移能力的影響。
　　 方法:采用LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染miR-206進入

2、MDA-MB-231細胞,48 h后處理,Western blot檢測轉(zhuǎn)染后乳腺癌細胞Cdc4、MMP-2和MMP-9蛋白質(zhì)表達。用免疫熒光顯微鏡觀察細胞形態(tài)及細胞絲狀偽足的改變并計數(shù)細胞偽足的數(shù)量；進一步用侵襲遷移實驗檢測轉(zhuǎn)染前后細胞侵襲力和遷移力的變化。
　　 結(jié)果:Western blot檢測Cdc42、MMP-2和MMP-9在轉(zhuǎn)染前后的表達,發(fā)現(xiàn)其條帶灰度值與陰性對照組相比都明顯下降(P<0.01)；免疫熒光計數(shù)每個細胞

3、平均絲狀偽足數(shù),空白對照組為(14.99±5.53),表皮生長因子(EGF)組為(23.59±3.92),miR-206轉(zhuǎn)染組為(9.45±3.59),miR-206+EGF組為(11.77±2.85)。與空白對照組和EGF組相比,miR-206轉(zhuǎn)染組或miR-206+EGF組的細胞絲狀偽足明顯減少(P<0.05)。侵襲實驗結(jié)果顯示,小室膜下的細胞數(shù)量空白對照組為(311.7+23.5),miR-206轉(zhuǎn)染組為(65.0±13.9),兩

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