口腔扁平苔蘚中神經(jīng)肽P物質(zhì)與血管活性腸肽的表達(dá)研究.pdf

1、目的:口腔扁平苔蘚(oral lichen planus,OLP)是一種發(fā)生在口腔黏膜的慢性或亞急性炎癥性疾病。OLP病程遷延,反復(fù)發(fā)作,嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量；有一定惡變率,WHO將其列入癌前狀態(tài)(precancerouscondition)。其病因與發(fā)病機制尚無定論,多認(rèn)為是T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病,目前亦無特效治療方法。臨床觀察患者常因緊張、精神壓力、情緒不佳而使病情加重,提示OLP的發(fā)生發(fā)展與神經(jīng)免疫相關(guān)。OLP的組織病理

2、學(xué)特征為:上皮過度或不全角化,顆粒層增厚,棘層不規(guī)則肥厚；基底細(xì)胞液化變性,表皮下致密淋巴細(xì)胞為主的帶狀浸潤。P物質(zhì)(substanceP,SP)、血管活性腸肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)屬于神經(jīng)肽類物質(zhì),黏膜中的神經(jīng)肽來源于神經(jīng)系統(tǒng)和一些局部細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞等,它們可以調(diào)控和促進(jìn)免疫及炎癥反應(yīng)如趨化免疫細(xì)胞、調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的產(chǎn)生及舒張微血管等。結(jié)合OLP的臨床病理特點,可以假設(shè)

3、神經(jīng)肽可能與OLP的發(fā)生或發(fā)展有關(guān),本實驗擬通過免疫組織化學(xué)(immumohistochemistry,IHC)法以及雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法研究SP、VIP在OLP患者組織、血液、唾液中的表達(dá)情況,并分析它們與OLP的關(guān)系。方法:OLP患者均來源于2008年8月～2009年12月間就診于瀘州醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院口腔內(nèi)科的患者,選取經(jīng)臨床結(jié)合組織病理確診為O

4、LP的口腔黏膜組織標(biāo)本19例、血清標(biāo)本13例、唾液標(biāo)本16例。所有病例就診前未接受激素類藥物治療。選取瀘州醫(yī)學(xué)院附屬口腔醫(yī)院口腔外科切齦手術(shù)以及系帶手術(shù)所切黏膜組織19例、健康志愿者血清13例、健康志愿者唾液16例作為正常對照標(biāo)本。實驗分三個部分進(jìn)行。第一部分采用IHC檢測OLP和正常人口腔黏膜組織中SP、VIP的表達(dá)；第二部分采用ELISA法測定OLP和正常人血清中SP、VIP的表達(dá)；第三部分同樣采用ELISA法測定OLP和正常人唾液

5、中 SP、VIP的表達(dá)。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析實驗結(jié)果,免疫組化結(jié)果采用秩和檢驗分析各項指標(biāo)在OLP組和對照組的表達(dá)情況,計量資料組間兩兩比較用t檢驗,P<0.05時有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:第一部分實驗結(jié)果:1.OLP組織中有SP表達(dá),細(xì)胞胞漿呈陽性染色,主要分布在上皮的棘細(xì)胞層,部分顆粒層、角質(zhì)層也有表達(dá)；正常黏膜中也有SP表達(dá),主要分布在基底細(xì)胞胞漿。比較OLP組和正常對照組SP的表達(dá),P=0.000(P<0.05),其差異有

6、統(tǒng)計學(xué)意義,即SP在OLP病損組織中表達(dá)高于正常黏膜組織。比較SP在糜爛型OLP組與非糜爛型OLP組的表達(dá),P=0.348(P>0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2.VIP主要表達(dá)于OLP組織的棘細(xì)胞層胞漿,有2例表達(dá)在棘細(xì)胞層和基底層細(xì)胞胞膜；正常黏膜中不表達(dá)或表達(dá)于基底層細(xì)胞胞漿。比較OLP組和正常對照組VIP的表達(dá),P=0.012(P<0.05),其差異有統(tǒng)計學(xué)意義,即VIP在OLP病損組織中表達(dá)高于正常黏膜組織。比較VIP在糜爛型O

7、LP組與非糜爛型OLP組的表達(dá),P=0.141(P>0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。第二部分實驗結(jié)果:1.SP在 OLP患者血清和正常對照組血清中的表達(dá)比較,P=0.014(P<0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,即OLP患者血清SP的含量高于健康對照組血清SP的含量。2.VIP在OLP患者血清和正常對照組血清中的表達(dá)比較,P=0.314(P>0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義,即OLP患者血清VIP的含量與健康對照組無差異。第三部分實驗結(jié)果:1.O

8、LP組和正常對照組唾液中SP含量分別為287.83±49.74ng/ml,256.38±56.77ng/ml,P=0.079(P>0.05),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。2.VIP在OLP患者唾液和正常對照組唾液中的表達(dá)比較,P=0.014(P<0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,即OLP患者唾液中VIP的含量高于健康對照組唾液中VIP的含量。結(jié)論:1.SP在OLP組織及血清中表達(dá)均增高,SP在OLP的發(fā)生發(fā)展中可能參與了淋巴細(xì)胞的浸潤及增殖,并參與了