神經(jīng)肽P物質(zhì)對(duì)小鼠毛囊周期影響的研究.pdf

1、目的：
　　通過皮下注射神經(jīng)肽P物質(zhì)（SP），觀察SP對(duì)C57BL/6小鼠毛囊周期的影響，探討SP在脫發(fā)中的作用及可能的機(jī)制。
　　方法：
　　選用雌性C57BL/6小鼠用松蠟合劑的方法將小鼠脫毛，隨機(jī)將脫毛后的小鼠分為正常組、10-6SP組和10-5SP組，對(duì)應(yīng)的在各組小鼠頸背部皮下注射PBS溶液、10-5mol/L和10-6/mol/L的SP溶液，分別于注射后的第1、5、9、19天時(shí)觀察注射區(qū)域的皮膚顏色變化情況；

2、同時(shí)選取第9、19天為時(shí)間點(diǎn)，測(cè)定該時(shí)間段注射部位的灰度值，并在該時(shí)間點(diǎn)時(shí)取小鼠注射部位的皮膚組織，HE染色下觀察各時(shí)間點(diǎn)毛囊的組織學(xué)形態(tài)變化、并計(jì)數(shù)該時(shí)期的毛囊個(gè)數(shù)、甲苯胺藍(lán)染色法觀察該時(shí)間段肥大細(xì)胞釋放脫顆粒的情況、免疫組織化學(xué)法檢測(cè)CK19和Nestin在此時(shí)段組織切片中特定部位的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.處理部位的皮膚顏色變化：通過灰度值測(cè)定，注射后第9天，對(duì)照組小鼠注射部位為黑色，10-6SP組為深灰色，10

3、-5SP組為淺灰色；注射后第19天，對(duì)照組小鼠注射部位為粉色，10-6SP組為淺灰色，10-5SP組為深灰色；
　　2.HE染色橫切片中各組毛囊個(gè)數(shù)比較：注射后第9天，與對(duì)照組相比較，10-6SP組 SP和10-5SP組中毛囊個(gè)數(shù)減少，其差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；脫毛后第19天，與對(duì)照組相比，10-6SP組和10-5SP組中毛囊個(gè)數(shù)增加，其差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；且毛囊形態(tài)學(xué)顯示注射后第9天，對(duì)照組中注射部位毛囊

4、呈生長(zhǎng)晚期表現(xiàn)，10-6SP組中呈生長(zhǎng)中期，10-5SP組中為生長(zhǎng)早期；注射后第19天，對(duì)照組、10-6SP組、10-5SP組中注射部位的毛囊分別處于靜止期，退行期和生長(zhǎng)晚期。
　　3.注射后第9天和第19天，對(duì)照組中可見淡紫色呈團(tuán)塊狀的肥大細(xì)胞，局部幾乎未發(fā)生脫顆?，F(xiàn)象；在10-5SP組和10-6SP組中，在部分肥大細(xì)胞的局部可見到脫顆粒的現(xiàn)象。注射后第9天，與對(duì)照組相比,10-5SP組和10-6SP組中的MC脫顆粒數(shù)增多，其差

5、別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；注射后第19天，10-5SP組和10-6SP組中肥大細(xì)胞脫顆粒數(shù)比對(duì)照組中 MC脫顆粒顯著增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；且注射后的第9天和第19天，10-5SP組比10-6SP組中MC脫顆粒數(shù)顯著增加。
　　4.免疫組化表達(dá)情況：注射后第9天和19天，在對(duì)照組、10-6SP組、10-5SP組中的毛囊外根鞘、部分汗腺以及基底層中都可見CK19陽性細(xì)胞，且各組組織中CK19在隆突區(qū)和外根鞘的陽性

6、表達(dá)情況無明顯差別，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在各組皮膚組織中的表皮、皮脂腺、部分汗腺以及毛囊隆突區(qū)和毛囊內(nèi)外根鞘中都可見到Nestin陽性細(xì)胞，其在隆突區(qū)和外根鞘中的陽性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；第19天時(shí)，CK19和Nestin的陽性細(xì)胞出現(xiàn)的位置與第9天相同，各組的CK19和Nestin陽性表達(dá)率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.皮下注射SP溶液后可影響小鼠毛囊周期的正常進(jìn)展，表現(xiàn)為減