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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.比較用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)急性、亞急性和慢性造模PD小鼠空間參考記憶改變的差異:
2.研究PD小鼠空間參考記憶改變和多巴胺系統(tǒng)改變的關(guān)系。
方法:
1.60只雄性8周齡C57BL/6小鼠被隨機(jī)分成6組:急性實(shí)驗(yàn)組(AT,n=10),急性對(duì)照組(AC,n=10),亞急性實(shí)驗(yàn)組(ST,n=10),亞急性對(duì)照組(SC,n=10),慢性實(shí)驗(yàn)組
2、(CT,n=10)和慢性對(duì)照組(CC,n=10)。
2.急性實(shí)驗(yàn)組以MPTP連續(xù)腹腔注射2天,每天4次,每次20mg/kg;亞急性實(shí)驗(yàn)組以MPTP連續(xù)腹腔注射8天,每天1次,每次20mg/kg;慢性實(shí)驗(yàn)組以MPTP連續(xù)腹腔注射4周,每周2次,每次20mg/kg;對(duì)照組以等量生理鹽水腹腔注射。
3.MPTP給藥結(jié)束后用Morris水迷宮檢測(cè)6組小鼠的空間參考記憶,檢測(cè)結(jié)束后處死小鼠分離中腦、紋狀體、海馬和前額葉
3、皮層。
4.用高效液相(HPLC)檢測(cè)紋狀體、海馬和前額葉皮層的多巴胺含量,用免疫組化染色檢測(cè)黑質(zhì)的酪氨酸羥化酶(TH)陽(yáng)性神經(jīng)元。
結(jié)果:
1.行為學(xué)觀察:6組小鼠的平均游泳速度沒(méi)有區(qū)別。慢性實(shí)驗(yàn)組的逃避潛伏期與其對(duì)照組比較有明顯延長(zhǎng)(p<0.05),而急性和亞急性實(shí)驗(yàn)組與其對(duì)照組比較則無(wú)明顯變化,由此表明慢性實(shí)驗(yàn)組的空間參考記憶受到損害,而急性和亞急性實(shí)驗(yàn)組則不受影響。
2.高
4、效液相檢測(cè):三組實(shí)驗(yàn)組紋狀體中多巴胺含量與其對(duì)照組比較有顯著減少(p<0.01),而三組實(shí)驗(yàn)組之間則無(wú)明顯差別。急性實(shí)驗(yàn)組前額葉皮層的多巴胺含量與對(duì)照組比較有顯著減少(p<0.05),亞急性和慢性實(shí)驗(yàn)組則無(wú)顯著減少。三組實(shí)驗(yàn)組海馬中多巴胺含量與其對(duì)照組比較都無(wú)明顯差別。
3.免疫組化結(jié)果:三組實(shí)驗(yàn)組黑質(zhì)中TH陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)量與其對(duì)照組比較有顯著減少(p<0.05),但三組實(shí)驗(yàn)組之間則無(wú)明顯差別。
結(jié)論:
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