合江縣斯氏肺吸蟲病流行病學(xué)調(diào)查，JAK-STAT和NF-Kβ在此病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺、肝、腦中的表達(dá)與病理觀察.pdf

1、目的:了解合江縣及毗鄰地區(qū)肺吸蟲病流行現(xiàn)狀；觀察斯氏肺吸蟲病實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型肺、肝、腦組織超微病理結(jié)構(gòu),觀察JAK—STAT、NF—Kβ通路表達(dá)。方法:溪蟹分部位解剖并計(jì)算囊蚴感染率(度),問卷調(diào)查,肺吸蟲病金標(biāo)滲濾試劑盒(DIGFA—Kit)檢測血清抗體,抗體陽性者做肝功檢查；自流行區(qū)采集溪蟹,分離斯氏肺吸蟲囊蚴,經(jīng)腹腔注射感染犬,3月后剖殺,取肺、肝組織并檢獲成蟲備用,肺吸蟲成蟲制備抗原,用腦立體定位儀微量注射肺吸蟲抗原至大鼠大腦皮質(zhì)建

2、立大腦損傷模型,對照組注射生理鹽水,24h后解剖大鼠取腦組織；固定、切片。光鏡下觀察蟲體周圍和抗原注射周圍的組織細(xì)胞反應(yīng),電鏡下觀察超微病理結(jié)構(gòu)改變,免疫組織化學(xué)方法觀察JAK—STAT和NF—Kβ信號(hào)通路的表達(dá)活性。結(jié)果:(1)第二中間宿主以鋸齒華溪蟹為主,川南流行區(qū)溪蟹的肺吸蟲囊蚴攜帶率為92.37％(2453/2656),蟲種鑒定為斯氏肺吸蟲(Pagumogonimus Skr jabi-ni),流行區(qū)居民食生蟹率21.53％(2

3、08/966),皮下游走性包塊者4.51％(43/966),流行區(qū)人群血清學(xué) DIGFA—Kit檢測肺吸蟲抗體陽性率為4.84％(24/496),川南流行區(qū)人群有生食和半生食溪蟹的習(xí)慣,且感染與鎮(zhèn)村、職業(yè)、年齡有關(guān),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),血清肺吸蟲抗體陽性者肝功結(jié)果顯示 Y球蛋白升高,白球蛋白比例倒置；(2)斯氏肺吸蟲病肺、肝、腦組織損害的動(dòng)物模型建立,感染犬肺和肝表面有突起結(jié)節(jié),質(zhì)稍硬,有纖維疤痕形成。HE顯示感染犬支氣管

4、腔有壞死細(xì)胞碎屑或蟲卵,肺泡有蟲卵沉積,卵周有淋巴細(xì)胞浸潤,肺泡囊有陷塌,肺泡隔破壞；感染犬肝切片見壞死灶,嗜酸性粒細(xì)胞浸潤及嗜酸性膿腫形成,壞死周圍有肉芽腫及纖維組織包裹,肝細(xì)胞氣球樣變,萎縮、變性、壞死,肝竇擴(kuò)張；抗原注射大鼠腦血腫周圍組織水腫明顯,且局灶狀壞死,神經(jīng)元皺縮,尼氏小體溶解,周圍出現(xiàn)間隙,神經(jīng)突呈淺淡或消失,可見單核細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。電鏡顯示感染犬肺可見Ⅰ、Ⅱ型上皮細(xì)胞腫脹、剝脫,細(xì)胞核破壞,線粒體腫脹、嵴斷裂,內(nèi)質(zhì)

5、網(wǎng)擴(kuò)張、空泡樣變；大量滲出液,嗜酸性粒細(xì)胞,單核細(xì)胞浸潤；肺泡隔破壞,細(xì)胞水腫破壞。感染犬肝細(xì)胞水腫,細(xì)胞器破壞,線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,肝血竇紅細(xì)胞破壞,內(nèi)皮細(xì)胞水腫?？乖⑸浣M大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元胞體腫脹,核移位且形狀不規(guī)則,核膜凸凹不平,核質(zhì)溢出；染色質(zhì)為絮狀；線粒體腫脹,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張呈囊泡化；脂褐素較多。(3)免疫組化顯示正常犬肺中STAT和 NF—Kβ弱陽性表達(dá)；感染犬肺可見 STAT和 NF—Kβ陽性細(xì)胞,免疫陽性物質(zhì)呈棕褐

6、色,NF—Kβ在肺氣道表達(dá)多,STAT在肺實(shí)質(zhì)表達(dá)多,組間存在顯著性差異(X2=476,X2=521,P<0.05)。正常犬肝中 STAT和NF—Kβ弱陽性表達(dá):感染犬實(shí)驗(yàn)組肝可見STAT和NF—Kβ陽性細(xì)胞,以肝細(xì)胞壞死區(qū)明顯,胞質(zhì)和胞核中可見陽性表達(dá),組間存在顯著性差異(X2=405,X2=434,P<0.05)。正常對照組大鼠腦中STAT和NF—Kβ弱陽性表達(dá):抗原注射組大鼠腦中可見STAT和NF—Kβ陽性細(xì)胞,以大腦皮質(zhì)損傷區(qū)明

7、顯,胞質(zhì)和胞核中見陽性表達(dá),組間存在顯著性差異(X2=476,X2=447,P<0.05)。結(jié)論:(1)肺吸蟲在肺、肝、腦組織中機(jī)械破壞作用和炎癥病理反應(yīng)激活了JAK—STAT、NF—Kβ信號(hào)通路的表達(dá)。(2)肺吸蟲病引起組織超微結(jié)構(gòu)改變:細(xì)胞腫脹,線粒體腫脹,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。(2)川南流行區(qū)肺吸蟲病的隱性感染依然存在；肺吸蟲病對當(dāng)?shù)鼐用裼绕涫侵行W(xué)生存在著很大的危害:應(yīng)加強(qiáng)肺吸蟲病防治知識(shí)的宣傳和教育,制定相應(yīng)的防制措施,阻斷該病在川南地