抗前列腺干細胞抗原單克隆抗體的制備.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、抗前列腺干細胞抗原單克隆抗體雜交瘤細胞株的建立 目的:制備分泌抗前列腺干細胞抗原單克隆抗體的雜交瘤細胞株.方法:1)利用PC-3前列腺癌細胞作為抗原免疫BALB/c小鼠,取脾細胞和SP2/0骨髓瘤細胞融合,通過HAT培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng),使目的細胞增殖并形成克隆;2)以PC-3細胞為抗原包板,行ELISA檢測,篩選出陽性克隆;3)對陽性克隆進行單克隆化,證實雜交瘤細胞穩(wěn)定分泌相應(yīng)的單克隆抗體,予凍存,保種;4)小鼠腹腔注射雜交瘤細胞,大量生

2、產(chǎn)單克隆抗體.結(jié)論:初步建立起一株分泌抗前列腺干細胞抗原單克隆抗體的雜交瘤細胞株.抗前列腺干細胞抗原單克隆抗體的鑒定 目的:對單克隆抗體的特性進行鑒定,為應(yīng)用提供理論依據(jù).方法:亞類鑒定:抗小鼠IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3重鏈單抗作為分型抗體,運用雙向免疫擴散法進行亞類鑒定;組織特異性分析:腫瘤及正常人體組織標(biāo)本制成石蠟切片,細胞制成懸液涂在玻片上,95％酒精固定,進行免疫組化染色.結(jié)論:抗前列腺干細胞抗原單克隆抗

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