不同濃度七氟醚預(yù)先給藥對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的影響及機(jī)制探討.pdf

1、[目的]腎臟缺血再灌注損傷是造成術(shù)后早期腎功能不全的重要原因，是影響移植腎早期功能恢復(fù)與慢性移植腎失功能的關(guān)鍵因素之一[1]。腎臟缺血再灌注可引起腎實質(zhì)細(xì)胞數(shù)目減少，腎組織結(jié)構(gòu)萎縮，腎功能降低。七氟醚具有誘導(dǎo)迅速、氣道刺激性小等優(yōu)點，已廣泛應(yīng)用于臨床麻醉。研究表明，2.2％七氟醚具有心、腦、腎器官保護(hù)作用，七氟醚對KIRI保護(hù)作用的機(jī)制研究主要集中在抗細(xì)胞壞死和炎癥反應(yīng)。血紅素氧合酶-1(HO-1)為誘導(dǎo)型HO，又稱熱休克蛋白-32(H

2、SP-32)，廣泛存在于各種組織細(xì)胞的微粒體中，是生物體內(nèi)較易被誘導(dǎo)的抗氧化酶類，應(yīng)激、低氧等因素均可誘導(dǎo)其適應(yīng)性表達(dá)，發(fā)揮抗氧化、抗炎、抗凋亡的細(xì)胞保護(hù)作用。本研究擬從氧化應(yīng)激、炎性反應(yīng)、細(xì)胞凋亡三方面探索七氟醚預(yù)先給藥對大鼠腎臟缺血再灌注損傷的影響及可能機(jī)制，以及該影響是否存在濃度差異，為臨床麻醉藥物種類及劑量的選擇提供實驗依據(jù)。
　　[方法]健康清潔級雄性Sprague Dawley(SD)大鼠50只，體重220g～260g

3、，采用隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠隨機(jī)分為5組(n=10)：對照組(C組)、缺血再灌注組(I/R組)、缺血再灌注+2.2％七氟醚組(S1組)、缺血再灌注+2.8％七氟醚組(S2組)、缺血再灌注+3.3％七氟醚組(S3組)。C組大鼠腹部正中切口，右腎切除，左腎蒂游離后，縫合腹腔；I/R組采用右側(cè)腎切除，左腎蒂夾閉45min后恢復(fù)灌注3h的方法建立大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型；S1組、S2組、S3組自模型制備前30min起分別吸入2.2％、2.8％、3

4、.3％七氟醚和氧氣的混合氣體直至再灌注3h。于再灌注3h時，采集下腔靜脈血樣5ml，測定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)濃度；處死大鼠，取腎組織，采用HE染色法，光鏡下觀察腎組織病理學(xué)改變，TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡，計算細(xì)胞凋亡指數(shù)，測定NF-κB、TNF-α、IL-8、ICAM-1、MDA含量及SOD活性，采用western blot和RT-PCR法測定HO-1 mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　[結(jié)果]與C組相比，I/R組，S1

5、、S2、S3組血清BUN、Cr濃度，腎臟近端小管壞死程度，細(xì)胞凋亡指數(shù)，NF-κB、TNF-α、IL-8、ICAM-1、MDA含量均升高，SOD活性降低，HO-1mRNA及蛋白表達(dá)均上調(diào)(P<0.05)。與I/R組相比，S1、S2、S3組血清BUN、Cr濃度，腎臟近端小管壞死程度，細(xì)胞凋亡指數(shù)，NF-κB、TNF-α、IL-8、ICAM-1、MDA含量均降低，SOD活性升高，HO-1mRNA表達(dá)上調(diào)(P<0.05)；S1、S2、S3、I

6、/R組間HO-1蛋白表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；與S2組相比，S1組NF-κB、TNF-α、ICAM-1含量均升高，S3組均降低(P<0.05)；S1、S2、S3組間腎臟近端小管壞死程度，細(xì)胞凋亡指數(shù)，IL-8、MDA含量，SOD活性，HO-1 mRNA表達(dá)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　[結(jié)論]七氟醚預(yù)先給藥可通過抗氧化、減少炎性因子釋放、抑制細(xì)胞凋亡減輕大鼠腎臟缺血再灌注損傷，該作用可能與HO-1mRNA