缺血再灌注損傷對大鼠腎臟足細胞podocin表達的影響及意義.pdf

1、研究背景:通過動物實驗觀察缺血再灌注(IschemiaReperfusion,I/R)引起大鼠腎臟足細胞表podocin的表達變化特點,進一步探討缺血再灌注腎損傷時對足細胞表面蛋白的影響和損傷的機制。
　　材料與方法:將60只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為對照組和模型組。對照組(S組):用20％的烏拉坦(0.1ml/100g)給予大鼠腹腔內(nèi)注射麻醉后,在其腹部正中線位置處切口,切口線長約3-5cm,分離出

2、雙側(cè)腎動脈后,立即關(guān)閉腹腔。模型組(M組):同樣的方法麻醉后,正中線打開腹腔,進腹找到腎蒂并鈍性游離腎動脈,分離出雙側(cè)腎動脈后用動脈夾夾閉,此時,紅潤的腎臟立刻變?yōu)辄S白色逐漸變?yōu)榘导t色,缺血30min后恢復(fù)灌流,4min后看到腎臟顏色逐漸變?yōu)榧t潤色,表明再灌注成功,逐層縫合大鼠腹正中切口(大鼠體溫在術(shù)中恒溫至37℃)。術(shù)后給大鼠適當(dāng)補水、保溫(37℃恒溫箱)。造模成功后根據(jù)實驗設(shè)計于選擇不同時間段采集標(biāo)本。用Western Blot法檢

3、測腎皮質(zhì)Podocin蛋白表的達量,采用CL-7200/7300全自動生化分析儀分別檢測血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)的含量,并與對照組進行比較。
　　研究結(jié)果:兩組大鼠攝水量和排尿量和攝食均有不同程度減少。M組24h組可見肉眼血尿。6h后血清尿素氮開始升高,48h達到高峰(P<0.05);而血肌酐則于48h升高(P<0.05)。S組各時間點的血清尿素氮、肌酐各項指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。蛋白印跡結(jié)果顯示,

4、兩組大鼠腎臟皮質(zhì)podocin蛋白在42KD均有明顯清晰條帶表達。但對照組表達更明顯,與其相比,模型組podocin蛋白于3h開始下降,以后各組表達逐漸下降(P<0.05),并且在48h組podocin蛋白下降最為明顯(P<0.01),且差異有統(tǒng)計學(xué)意義。S組各時間點podocin比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:(1)缺血再灌注腎損傷時大鼠腎功明顯發(fā)生改變,尿素氮早期開始升高,血肌酐晚期升高明顯,大鼠腎臟足細胞p