缺血再灌注損傷對(duì)大鼠腎臟足細(xì)胞podocin表達(dá)的影響及意義.pdf

1、研究背景:通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察缺血再灌注(IschemiaReperfusion,I/R)引起大鼠腎臟足細(xì)胞表podocin的表達(dá)變化特點(diǎn),進(jìn)一步探討缺血再灌注腎損傷時(shí)對(duì)足細(xì)胞表面蛋白的影響和損傷的機(jī)制。
　　材料與方法:將60只健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和模型組。對(duì)照組(S組):用20％的烏拉坦(0.1ml/100g)給予大鼠腹腔內(nèi)注射麻醉后,在其腹部正中線位置處切口,切口線長(zhǎng)約3-5cm,分離出

2、雙側(cè)腎動(dòng)脈后,立即關(guān)閉腹腔。模型組(M組):同樣的方法麻醉后,正中線打開(kāi)腹腔,進(jìn)腹找到腎蒂并鈍性游離腎動(dòng)脈,分離出雙側(cè)腎動(dòng)脈后用動(dòng)脈夾夾閉,此時(shí),紅潤(rùn)的腎臟立刻變?yōu)辄S白色逐漸變?yōu)榘导t色,缺血30min后恢復(fù)灌流,4min后看到腎臟顏色逐漸變?yōu)榧t潤(rùn)色,表明再灌注成功,逐層縫合大鼠腹正中切口(大鼠體溫在術(shù)中恒溫至37℃)。術(shù)后給大鼠適當(dāng)補(bǔ)水、保溫(37℃恒溫箱)。造模成功后根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)于選擇不同時(shí)間段采集標(biāo)本。用Western Blot法檢

3、測(cè)腎皮質(zhì)Podocin蛋白表的達(dá)量,采用CL-7200/7300全自動(dòng)生化分析儀分別檢測(cè)血清中肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)的含量,并與對(duì)照組進(jìn)行比較。
　　研究結(jié)果:兩組大鼠攝水量和排尿量和攝食均有不同程度減少。M組24h組可見(jiàn)肉眼血尿。6h后血清尿素氮開(kāi)始升高,48h達(dá)到高峰(P<0.05);而血肌酐則于48h升高(P<0.05)。S組各時(shí)間點(diǎn)的血清尿素氮、肌酐各項(xiàng)指標(biāo)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。蛋白印跡結(jié)果顯示,

4、兩組大鼠腎臟皮質(zhì)podocin蛋白在42KD均有明顯清晰條帶表達(dá)。但對(duì)照組表達(dá)更明顯,與其相比,模型組podocin蛋白于3h開(kāi)始下降,以后各組表達(dá)逐漸下降(P<0.05),并且在48h組podocin蛋白下降最為明顯(P<0.01),且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。S組各時(shí)間點(diǎn)podocin比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論:(1)缺血再灌注腎損傷時(shí)大鼠腎功明顯發(fā)生改變,尿素氮早期開(kāi)始升高,血肌酐晚期升高明顯,大鼠腎臟足細(xì)胞p