plkl與p21WAFl-CIPl在肝細胞癌中的表達研究.pdf

1、肝細胞癌(HCC)是原發(fā)性肝癌中最常見的組織學類型，也是我國常見惡性腫瘤之一。肝癌的發(fā)生是一個多因素參與、多步驟累積的復雜過程，包括癌基因的激活和抑癌基因的失活，但其具體分子機制尚不清楚。因此，研究肝細胞癌中的基因異常表達對于闡明肝癌發(fā)生機制具有重要意義。
　　 plk1是有絲分裂過程中的一種重要激酶，在細胞周期過程中發(fā)揮多種作用。近年來，plk1與腫瘤的關系日益受到人們的關注，目前已在食管癌、胃癌、肝癌、結直腸癌等多種實體腫瘤

2、組織中檢測到plk1蛋白的過表達，且plk1蛋白的過表達與腫瘤患者的低存活率之間有顯著的相關性，但是plk1在腫瘤中過表達的機制目前還不清楚。一些研究發(fā)現(xiàn)，細胞周期抑制因子p21WAF1/C1F1可以直接作用于plk1基因啟動子區(qū)，抑制plk1基因的表達，提示腫瘤組織中plk1蛋白的過表達可能與p21蛋白有關。本試驗采用Western-blot方法檢測10對肝細胞癌組織中p21和plk1蛋白的表達，并在HepG2細胞水平觀察p21過表達

3、對plk1蛋白和mRNA的改變，探討我國肝細胞癌組織中p21和plk1蛋白表達的相關性，為了解肝細胞癌的發(fā)生機制提供新的實驗依據(jù)。
　　 目的：
　　 細胞周期抑制因子p21WAF1/C1F1(p21)可在轉(zhuǎn)錄水平抑制polo-like kinase1(plk1)基因的表達，本文詣在探討plk1和p21WAF1/C1F1(p21)蛋白在肝細胞癌中的表達及相關性。
　　 材料與方法：
　　 1.組織標本10

4、例肝癌組織及配對癌旁組織標本取自于河南省腫瘤醫(yī)院手術切除標本，經(jīng)病理證實診斷為原發(fā)性肝細胞肝癌。癌旁組織取自癌旁5cm以外的非腫瘤肝組織，組織標本離體后，立即置于液氮中冷凍備用。所有肝癌患者均為男性，年齡在45-55歲之間，平均年齡為51±11.53歲。上述樣本取材前均經(jīng)患者知情同意。
　　 2.試驗方法應用Western方法檢測10對肝癌和配對癌旁組織中p21和plk1兩種蛋白的表達情況。通過將pflex-p21表達質(zhì)粒瞬時轉(zhuǎn)

5、染人肝癌細胞系HepG2細胞，進一步檢測p21過表達對plk1mRNA和蛋白表達的影響。
　　 3.統(tǒng)計學分析采用SPSS11.5軟件進行t檢驗，定義p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 與癌旁組織相比，plk1在10例肝癌組織中的表達都高于癌旁組織，p21在7例肝癌組織中的表達高于配對癌旁組織。而在3例肝癌組織中的表達與配對癌旁組織沒有明顯差異。人肝癌細胞系HepG2細胞轉(zhuǎn)染pflex-p21表