復(fù)心煎對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、近年來,缺血性心臟病治療后引起的心肌缺血再灌注損傷(MIRI)已成為臨床上亟待攻克的難題之一,研究開發(fā)切實(shí)有效的藥物成為研究熱點(diǎn)。復(fù)心煎系中醫(yī)臨床經(jīng)驗(yàn)方劑,具有益氣活血之功效,近年來在缺血性心臟病的臨床治療中取得了滿意療效。但其保護(hù)機(jī)制尚不明確,本文通過整體動(dòng)物和體外細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),觀察復(fù)心煎對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用,并初步探索其作用機(jī)制,具體研究?jī)?nèi)容如下:
　　 (1)采用結(jié)扎冠狀動(dòng)脈法制備大鼠心肌缺血再灌注損傷模型,結(jié)

2、扎20min后再灌注120min。實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為偽手術(shù)組、模型組、氟伐他汀組及復(fù)心煎高、低劑量組,記錄各組大鼠心電圖ST段變化,HE染色觀察大鼠心肌組織病理形態(tài)學(xué)變化,NBT染色測(cè)量大鼠心肌梗死范圍,并檢測(cè)大鼠血清LOH、AST、CK-MB活性。
　　 (2)按上述方法制備大鼠MIRI模型后,檢測(cè)各組大鼠血清中SOD、MDA、GSH—Px及NO的含量變化,TUNEL法檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡,RT-PCR測(cè)定心肌組織iNOS mRNA

3、的表達(dá)。
　　 (3)對(duì)乳鼠心肌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),通過MTT測(cè)定心肌細(xì)胞存活率,確定藥物安全作用范圍:采用Na2S2O4造成缺氧／復(fù)氧模型,分別給予相應(yīng)濃度的復(fù)心煎藥液進(jìn)行預(yù)處理,觀察各給藥組的細(xì)胞形態(tài)變化和細(xì)胞存活率變化,并檢測(cè)細(xì)胞上清液中LDH和MDA水平。
　　 結(jié)果表明:(1)復(fù)心煎可明顯降低大鼠缺血再灌注后引起的ST段位移,改善心肌組織病理損害,降低血清中LDH、AST、CK-MB活性；與模型組相比,復(fù)心煎可一

4、定程度上縮小心肌梗死范圍,提示復(fù)心煎對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。
　　 (2)復(fù)心煎高劑量組血清中SOD和GSH-Px活性明顯升高,MDA含量降低,復(fù)心煎低劑量組與模型組相比無顯著性差異；復(fù)心煎高、低劑量組可明顯減少心肌細(xì)胞凋亡,抑制iNOS mRNA的表達(dá),提示復(fù)心煎可通過多環(huán)節(jié)發(fā)揮對(duì)大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
　　 (3)采用MTT法確定藥物安全濃度后,給予相應(yīng)濃度的藥液,發(fā)現(xiàn)復(fù)心煎可改善心肌細(xì)胞形