桿菌狀載甲氨喋呤納米團(tuán)簇的制備、表征及性能研究.pdf

1、納米粒子作為藥物載體廣泛應(yīng)用于腫瘤的治療研究，目前大量研究集中在納米粒子尺寸和表面修飾，以便改善藥物遞送性能和癌癥治療效果。最近研究表明，納米粒子的形貌在藥物釋放、細(xì)胞吞噬、藥物代謝、生物分布和細(xì)胞攝取等方面扮演重要的角色，異形納米粒子如盤狀，棒狀，針狀納米粒子，相比與球形納米粒子而言，可以降低巨噬細(xì)胞的非特異攝取，延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間，增強(qiáng)腫瘤積累和細(xì)胞內(nèi)化，因此成為了藥物傳輸領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。近幾年的研究證明，甲氨喋呤由于結(jié)構(gòu)與葉酸高度相

2、似，既可以作為抗癌藥物，又可以作為靶向分子，具有“靶向/抗癌”雙功能特性。本課題利用甲氨喋呤的雙功能特點(diǎn)與形貌輔助藥物傳輸相結(jié)合的策略，設(shè)計(jì)了一種新型的基于生物可降解聚合物的桿菌狀載甲氨喋呤納米靶向給藥系統(tǒng)，并對(duì)其性能進(jìn)行了研究。
　　主要研究?jī)?nèi)容:(1)利用化學(xué)合成法制備甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-甲氨喋呤(MPEG-PLA-MTX)化合物，然后利用透析法自組裝形成相應(yīng)的納米粒子，最后借助SPG膜乳化器在高壓下制備桿菌狀MPEG-P

3、LA-MTX納米簇(NCs)，并與空白的MPEG-PLA納米粒子(NPs)以及MPEG-PLA-MTX NPs進(jìn)行對(duì)比性研究。(2)通過(guò)掃描電鏡(SEM)，透射電鏡(TEM)，核磁振動(dòng)(NMR)、紅外(IR)、X射線衍射(XRD)和動(dòng)態(tài)光散射(DLS)對(duì)它們粒徑大小、表面形貌、化學(xué)結(jié)構(gòu)、載藥量和包封率進(jìn)行了表征。(3)通過(guò)(CLSM)和流式細(xì)胞儀(FCM)研究了Hela細(xì)胞對(duì)粒子的攝取狀況;利用活體熒光成像和器官分布觀察了粒子在裸鼠體內(nèi)

4、的組織分布情況。通過(guò)體外釋藥實(shí)驗(yàn)研究了MPEG-PLA-MTX NCs的釋藥行為;通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)研究了其細(xì)胞毒性和對(duì)人宮頸癌細(xì)胞(Hela)的抑制率;通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和組織切片研究了MPEG-PLA-MTX-NCs的抑瘤率和抗癌效果。
　　主要研究結(jié)果:(1)制備了性能穩(wěn)定的、桿菌狀的MPEG-PLA-MTXNCs藥物緩釋系統(tǒng)。表征結(jié)果顯示，該法制備的載藥系統(tǒng)是由多個(gè)球形粒子構(gòu)成，透射電鏡測(cè)得粒徑寬度約為300 nm，長(zhǎng)度為2μm，但

5、由DLS測(cè)得的粒徑為200 nm左右。(2)細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)，成像和器官分布實(shí)驗(yàn)證明MTX能顯著提高Hela細(xì)胞對(duì)納米粒子的攝取，具有主動(dòng)靶向性，桿菌狀載藥系統(tǒng)相對(duì)于球形粒子其靶向性更為顯著。(3)體外釋藥實(shí)驗(yàn)表明，MPEG-PLA-MTXNCs顯示出pH依賴性。隨著pH的降低，加速了酯鍵的水解，藥物釋放加快。Hela細(xì)胞和成骨細(xì)胞(MC3T3)的MTT試驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和組織切片研究均表明桿菌狀的MPEG-PLA-MTXNCs相對(duì)于球形的MP