桿菌狀載甲氨喋呤納米團簇的制備、表征及性能研究.pdf

1、納米粒子作為藥物載體廣泛應用于腫瘤的治療研究，目前大量研究集中在納米粒子尺寸和表面修飾，以便改善藥物遞送性能和癌癥治療效果。最近研究表明，納米粒子的形貌在藥物釋放、細胞吞噬、藥物代謝、生物分布和細胞攝取等方面扮演重要的角色，異形納米粒子如盤狀，棒狀，針狀納米粒子，相比與球形納米粒子而言，可以降低巨噬細胞的非特異攝取，延長血液循環(huán)時間，增強腫瘤積累和細胞內(nèi)化，因此成為了藥物傳輸領域的研究熱點。近幾年的研究證明，甲氨喋呤由于結(jié)構(gòu)與葉酸高度相

2、似，既可以作為抗癌藥物，又可以作為靶向分子，具有“靶向/抗癌”雙功能特性。本課題利用甲氨喋呤的雙功能特點與形貌輔助藥物傳輸相結(jié)合的策略，設計了一種新型的基于生物可降解聚合物的桿菌狀載甲氨喋呤納米靶向給藥系統(tǒng)，并對其性能進行了研究。
　　主要研究內(nèi)容:(1)利用化學合成法制備甲氧基聚乙二醇-聚乳酸-甲氨喋呤(MPEG-PLA-MTX)化合物，然后利用透析法自組裝形成相應的納米粒子，最后借助SPG膜乳化器在高壓下制備桿菌狀MPEG-P

3、LA-MTX納米簇(NCs)，并與空白的MPEG-PLA納米粒子(NPs)以及MPEG-PLA-MTX NPs進行對比性研究。(2)通過掃描電鏡(SEM)，透射電鏡(TEM)，核磁振動(NMR)、紅外(IR)、X射線衍射(XRD)和動態(tài)光散射(DLS)對它們粒徑大小、表面形貌、化學結(jié)構(gòu)、載藥量和包封率進行了表征。(3)通過(CLSM)和流式細胞儀(FCM)研究了Hela細胞對粒子的攝取狀況;利用活體熒光成像和器官分布觀察了粒子在裸鼠體內(nèi)

4、的組織分布情況。通過體外釋藥實驗研究了MPEG-PLA-MTX NCs的釋藥行為;通過MTT實驗研究了其細胞毒性和對人宮頸癌細胞(Hela)的抑制率;通過動物實驗和組織切片研究了MPEG-PLA-MTX-NCs的抑瘤率和抗癌效果。
　　主要研究結(jié)果:(1)制備了性能穩(wěn)定的、桿菌狀的MPEG-PLA-MTXNCs藥物緩釋系統(tǒng)。表征結(jié)果顯示，該法制備的載藥系統(tǒng)是由多個球形粒子構(gòu)成，透射電鏡測得粒徑寬度約為300 nm，長度為2μm，但

5、由DLS測得的粒徑為200 nm左右。(2)細胞攝取實驗，成像和器官分布實驗證明MTX能顯著提高Hela細胞對納米粒子的攝取，具有主動靶向性，桿菌狀載藥系統(tǒng)相對于球形粒子其靶向性更為顯著。(3)體外釋藥實驗表明，MPEG-PLA-MTXNCs顯示出pH依賴性。隨著pH的降低，加速了酯鍵的水解，藥物釋放加快。Hela細胞和成骨細胞(MC3T3)的MTT試驗、動物實驗和組織切片研究均表明桿菌狀的MPEG-PLA-MTXNCs相對于球形的MP