名貴海洋中藥海龍的質量控制技術及注射用丹紅粉針指紋圖譜相關性研究.pdf

1、名貴海洋中藥海龍，為脊索動物門硬骨魚綱、海龍目、海龍科魚類。中藥海龍為海龍科動物尖海龍、擬海龍、刁海龍的干燥體(《中國藥典》2005)。其性甘、溫，歸肝、腎經，有溫腎壯陽、散結消腫的作用。主要用于陽痿遺精、癥瘕積聚、瘰疬痰核、跌打損傷等癥的治療。外治癰腫疔瘡。 作為傳統(tǒng)補益類中藥，海龍在臨床上應用廣泛，藥材市場售價達4000-8000元/kg，屬貴重藥材。《本草綱目拾遺》謂：“功倍海馬，催生尤捷效”。民間用藥(混淆品)還包括粗吻

2、海龍(Temminck et Schlegel)、棘海龍(海蝎魚)(Bleeker)、寶珈海龍(Bleeker)、貢氏柄頜海龍(Dunker)等。由于海龍藥材稀少，正品和代用品混用現象較為突出。關于海龍藥效物質基礎研究報道較少，其質量控制也僅限于外觀形態(tài)鑒別和經驗鑒別，未見其指紋圖譜及有效成分含量測定研究報道。 為了探索海洋中藥海龍的有效質量控制方法，本課題選擇形態(tài)特征明顯的海龍基源生物刁海龍(Gray)為研究對象，進行了系統(tǒng)化

3、學成分研究，得到了7個化合物，其中1個成分為首次自該藥材中分離得到。在此基礎上，進行了刁海龍指紋圖譜和質量控制方法研究，采用高效液相色譜(HPIC)法建立了藥材刁海龍的指紋圖譜，并建立了同時測定兩種指標成分DHA和EPA的含量測定方法，對10批不同來源的刁海龍藥材的質量進行了比較分析。進一步地，作為指紋圖譜技術的應用，對臨床前研究中的新藥“注射用丹紅粉針”進行了規(guī)范化指紋圖譜研究。研究結果將為名貴海洋中藥海龍的質量控制和品質評價提供科學

4、依據。 1．采用甲醇提取，柱色譜(CC)、制備高效液相色譜(PHPLC)等色譜分離方法，從藥材刁海龍中分離得到了7個化學成分。運用光譜和波譜等結構分析手名貴海洋中藥海龍的質量控制技術及注射用丹紅粉針指紋圖譜相關性研究段，鑒定它們的結構分別為：膽甾醇(M1)、膽甾-4-烯-3-酮(M2)、十六碳酸(M3)、十八碳酸(M4)、二十碳酸(MS)、二十碳五烯酸(EPA)(M6)、二十二碳六烯酸(DHA)(M7)其中，化合物M6為首次從該

5、藥材中得到。有文獻報道，DHA、EPA可能是海龍藥材溫腎壯陽作用的藥效物質基礎。 2．通過色譜條件的優(yōu)化和系統(tǒng)適應性試驗，以10批藥材為樣本，建立了藥材刁海龍的HPIC指紋圖譜。指紋圖譜中包含16個共有峰；通過與對照品對照，2個共有峰被指認為DHA和EPA；非共有峰面積小于10％，符合指紋圖譜技術要求。 3．采用國家藥監(jiān)局推薦使用的“相似度判斷軟件”，對不同來源的刁海龍藥材進行了相似度比較分析，結果表明，多數不同來源刁海

6、龍藥材的指紋圖譜相似度較高；采用建立的同時測定刁海龍藥材中DHA和EPA的HPLC含量測定方法，對不同來源的刁海龍藥材進行了DHA和EPA含量測定，結果表明，不同來源刁海龍藥材的DHA和EPA含量差異較大，其中，主產地廣東藥材(S1、S3、S4、S7)的含量較高。 4．作為指紋圖譜技術的應用，對臨床前研究中的新藥“注射用丹紅粉針”進行了規(guī)范化指紋圖譜研究。采用HPLC方法，建立了相同條件下原藥材(丹參、紅花)、中間體和注射劑(粉