五味子提取物逆轉(zhuǎn)阿霉素耐藥細(xì)胞株K562-DOX耐藥性的研究.pdf

1、目的：探討五味子提取物對(duì)阿霉素耐藥細(xì)胞株K562/DOX的耐藥逆轉(zhuǎn)作用
　　方法：本研究以人紅白血病阿霉素耐藥細(xì)胞株K562/DOX為研究對(duì)象，通過MTT法檢測(cè)阿霉素單獨(dú)作用，阿霉素與五味子提取物聯(lián)合作用下細(xì)胞存活率；RT-PCR檢測(cè)MDR1、MRP1 mRNA表達(dá)；Western blotting檢測(cè)耐藥相關(guān)蛋白（MDR1）、凋亡相關(guān)蛋白（Bcl-2）、以及核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)的表達(dá)。
　　結(jié)果：①單獨(dú)應(yīng)用阿霉素作用于

2、K562/DOX細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞存活率無明顯變化。當(dāng)阿霉素和五味子提取物聯(lián)合作用于K562/DOX細(xì)胞時(shí)，與對(duì)照組或阿霉素組比較，細(xì)胞存活率明顯下降(P<0.01)；②倒置顯微鏡下，K562/DOX細(xì)胞在沒有施加藥物作用時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，表面光滑，細(xì)胞透明，折光性好，細(xì)胞增殖旺盛，可見多數(shù)分裂相細(xì)胞。阿霉素單獨(dú)作用K562/DOX細(xì)胞是雖然出現(xiàn)了邊緣不整，折光性差，但對(duì)生長(zhǎng)幾乎無影響。而五味子提取物與阿霉素聯(lián)合作用K562/DOX細(xì)胞時(shí)

3、，細(xì)胞胞質(zhì)回縮，折光性差，邊緣不整，胞漿中出現(xiàn)顆粒狀物質(zhì)，細(xì)胞數(shù)目明顯減少，并呈濃度依賴性；③ RT-PCR結(jié)果表明：阿霉素單獨(dú)作用K562/DOX細(xì)胞時(shí)，與對(duì)照組相比MDR1、MRP mRNA表達(dá)未見明顯差異；阿霉素和不同濃度五味子提取物共同作用時(shí)，與對(duì)照組和阿霉素單獨(dú)作用時(shí)相比MDR1、MRP mRNA表達(dá)明顯下降(P<0.01)；④Western blotting結(jié)果顯示：阿霉素單獨(dú)作用K562/DOX細(xì)胞時(shí)，與對(duì)照組相比Bcl-

4、2、NF-κB（P65）、MDR1蛋白表達(dá)未見明顯差異；阿霉素和不同濃度五味子提取物共同作用時(shí)，與對(duì)照組和阿霉素單獨(dú)作用時(shí)相比Bcl-2、NF-κB（P65）、MDR1蛋白水平明顯下降(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　1．五味子提取物是有效且低毒的理想腫瘤細(xì)胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑。
　　2．五味子提取物對(duì)K562/DOX細(xì)胞MDR的逆轉(zhuǎn)具有濃度依賴性，即在一定濃度范圍內(nèi)，隨濃度增加而逆轉(zhuǎn)性增加。
　　3．五味子提取物