洛貝林逆轉(zhuǎn)乳腺癌耐藥細(xì)胞株MCF-7-ADM耐藥性的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：化療在乳腺癌綜合治療中占有非常重要地位，但由于耐藥的發(fā)生，影響了化療效果，甚至導(dǎo)致化療失敗，影響病人預(yù)后。因此，尋找耐藥逆轉(zhuǎn)劑、提高化療療效是腫瘤臨床急需解決的問(wèn)題。目前有關(guān)逆轉(zhuǎn)耐藥的研究比較多，研究最多的機(jī)制包括P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）誘導(dǎo)的藥物外排。本實(shí)驗(yàn)主要研究哌啶生物堿洛貝林是否具有逆轉(zhuǎn)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7/ADM耐藥的作用，并初步研究洛貝林逆轉(zhuǎn)多藥耐藥的機(jī)制。 方法：以人乳腺癌多藥

2、耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADM為研究對(duì)象，觀察在有無(wú)洛貝林干預(yù)的情況下多藥耐藥細(xì)胞MCF-7/ADM對(duì)化療藥敏感性的不同表現(xiàn)。用四氮哇藍(lán)（MTT）法測(cè)定ADM、5-Fu對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制率，包括ADM、5-Fu對(duì)MCF-7/ADM細(xì)胞株的抑制率和在洛貝林干預(yù)下ADM、5-Fu對(duì)MCF-7/ADM細(xì)胞株的抑制率，由此求取耐藥逆轉(zhuǎn)指數(shù)；用多功能酶標(biāo)儀測(cè)定在無(wú)干預(yù)措施以及洛貝林濃度分別為1μM、5μM、10μM、20μM、50μM、100μM干預(yù)

3、下細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的熒光強(qiáng)度；用流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定在無(wú)干預(yù)措施、洛貝林20μM濃度干預(yù)下及VRP20μM濃度干預(yù)下MCF-7/ADM細(xì)胞內(nèi)羅丹明123的積聚濃度，從功能學(xué)的角度觀察耐藥逆轉(zhuǎn)的情況，并把洛貝林與VRP的逆轉(zhuǎn)效果相對(duì)照。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果：1、10pM濃度洛貝林干預(yù)下，多藥耐藥細(xì)胞株MCF-7/ADM對(duì)化療藥的敏感性增加，ADM對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50由原來(lái)的（44.81±0.43）μg/

4、ml降至（16.72±0.75）μg/ml，逆轉(zhuǎn)指數(shù)約為2.68；5-Fu對(duì)耐藥細(xì)胞株的IC50由（53.12±1.60）μg/ml降至（38.90±1.43）μg/ml，逆轉(zhuǎn)指數(shù)約為1.37。2、洛貝林可抑制羅丹明123外排，當(dāng)洛貝林濃度≥10μM時(shí)熒光強(qiáng)度顯著高于對(duì)照，且隨洛貝林濃度的增加，抑制作用更加明顯。3、洛貝林抑制羅丹明123外排效果與經(jīng)典逆轉(zhuǎn)劑維拉帕米相比，20μM洛貝林的有效率約為20μM維拉帕米有效率的71.6％。