日本血吸蟲感染對飲食誘導(dǎo)的C57BL-6J脂肪肝小鼠肝組織TNF-α, NF-kB及Ym-1 mRNA表達的影響.pdf

1、目的：觀察日本血吸蟲感染對高脂飲食誘導(dǎo)的C57BL/6J脂肪肝小鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)與功能、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、核因子-kB(nuclear factor kappa B,NF-kB)及巨噬細胞選擇性活化標(biāo)志物Ym-1 mRNA水平在肝臟組織中表達的影響,探討血吸蟲感染后巨噬細胞選擇性活化對肥胖小鼠肝臟及胰島素抵抗的影響及可能機制。
　　方法：36只雄性C57BL/6J小鼠,隨

2、機分為正常對照(NC,n=12)組、高脂飲食(HF,n=12)組及高脂飲食復(fù)合日本血吸蟲感染(HSj,n=12)組。HF組經(jīng)高脂飲食建立肥胖模型,HSj組經(jīng)高脂飲食及日本血吸蟲感染建立肥胖復(fù)合血吸蟲感染模型。分別于高脂喂養(yǎng)第6周末及12周末時檢測空腹血糖（fasting peripheral blood glucose,FBG)、空腹血漿胰島素(fasting plasma insulin,FINS)水平,并計算胰島素抵抗指數(shù)(insu

3、lin resistance index,HOMA-IR),檢測肝組織勻漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase,ALT)、甘油三酯（triglyceride,TG)及膽固醇(cholesterol,TC)水平;HE染色觀察肝組織病理改變,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-RCR)檢測肝臟組織TNF-α和NF-kB及M2型巨噬

4、細胞的特異性標(biāo)志物Ym-1 mRNA表達情況。
　　結(jié)果：
　　1.高脂喂養(yǎng)第6周末時,HF組及HSj組小鼠體重均較NC組增加?20％,肥胖模型造模成功。第12周末時,HF組體重較NC組增加,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),HSj組體重與NC組比較無統(tǒng)計學(xué)意義,但低于HF組(P<0.05)。
　　2.第6周末時HF組FINS、HOMA-IR較NC組升高,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),HF組FBG較NC組升高差異無統(tǒng)計

5、學(xué)意義,HSj組HOMA-IR較HF組顯著下降(P<0.05),而HSj組FBG、FINS與HF組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。第12周末時HF組FBG、FINS、HOMA-IR均進一步升高且明顯高于同期NC組(P<0.05),HSj組FBG、FINS、HOMA-IR均較同期HF組下降(P<0.05)。
　　3.第6周末HF組小鼠肝勻漿TG較NC組升高有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),TC及ALT含量與NC組比較無統(tǒng)計學(xué)差異。HSj組TC、T

6、G水平較HF組下降(P<0.05),ALT變化不明顯。12周末時HF組肝勻漿TC、TG、ALT進一步較NC組升高(P<0.05),HSj組TC、TG較同期HF組下降有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),但ALT升高(P<0.05)。
　　4.肉眼觀,在第6周末時,NC組小鼠肝臟紅潤,HF組小鼠肝臟邊緣變鈍、微黃色,可見黃色脂肪斑,HSj組小鼠肝臟呈紅褐色,體積較HF組肝臟小,可見顆粒狀結(jié)節(jié);第12周末時,NC組小鼠肝臟外觀無明顯異常,HF

7、組及HSj組小鼠肝臟上述表現(xiàn)更加明顯。
　　5.光學(xué)顯微鏡下,在第6周末和第12周末NC組小鼠肝組織HE染色均未見明顯異常。第6周末時HF組小鼠肝細胞內(nèi)可見大小不等的脂滴空泡,第12周末肝細胞內(nèi)脂滴空泡更加明顯,可見氣球樣變及纖維化,HSj組小鼠第6周末可見少量大小不等的脂滴空泡及肝細胞壞死,第12周末時肝細胞壞死和肝纖維化加重。第6周末及第12周末HF組肝小葉內(nèi)及匯管區(qū)均可見炎性細胞浸潤,較同期HSj組浸潤增多。
　　6.

8、RT-PCR在第6周和第12周末時檢測HF組TNF-αmRNA及NF-kB mRNA表達均高于HSj組和NC組(P<0.05)。第6周末時,HF組Ym-1 mRNA的表達高于NC組和HSj組(P<0.05),第12周末時HSj組Ym-1 mRNA表達強度高于HF組和NC組(P<0.05),且較6周時表達增強(P<0.05)。
　　7.HF組小鼠HOMA-IR與肝組織TNF-αmRNA光密度相對值呈正相關(guān)(P<0.05),與NF-k

9、B mRNA光密度相對值無顯著相關(guān)性(P?0.05);HSj組小鼠HOMA-IR與肝組織Ym-1mRNA光密度相對值呈負相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.高脂飲食可誘導(dǎo)C57BL/6J肥胖小鼠及脂肪肝模型的建立,該模型具有胰島素抵抗的特征。
　　2.肥胖小鼠脂肪肝組織中炎癥因子TNF-α及調(diào)控因子NF-kB的表達水平與胰島素抵抗的形成有一定的關(guān)系。
　　3.日本血吸蟲感染可以增強肥胖小鼠脂肪肝肝組織中M