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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:本研究通過(guò)檢測(cè)低劑量飲酒大鼠各組織臟器、血漿、尿液的DNA氧化標(biāo)志物8-羥基脫氧鳥苷(8-oxo-dGsn)和RNA氧化標(biāo)志物8-羥基鳥苷(8-oxo-Gsn)的水平,探討低劑量飲酒與大鼠各組織臟器、血漿、尿液核酸氧化的關(guān)系;并從抗氧化物酶系統(tǒng)的角度進(jìn)一步研究低劑量飲酒對(duì)酒精的主要代謝器官——肝臟的核酸氧化的影響。
方法:四月齡的健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠48只,隨機(jī)分為對(duì)照組和飲酒組,飲酒組灌
2、胃56°二鍋頭酒按照每公斤體重1克(1g/kg),每天兩次,每周七天連續(xù)進(jìn)行。每天早晨9:00開始進(jìn)行第一次灌胃,7個(gè)小時(shí)后進(jìn)行第二次灌胃。對(duì)照組按照同樣的方法灌胃同等體積的生理鹽水。在灌胃4周(4w)、8周(8w)、12周(12w)時(shí),用同位素稀釋高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜(ID-LC-MS/MS)方法檢測(cè)大鼠各組織臟器、血漿、尿液中的DNA氧化標(biāo)志物8-oxo-dGsn和RNA氧化標(biāo)志物8-oxo-Gsn的含量。另外,我們還用分光光度法測(cè)定
3、肝臟組織的還原型谷胱甘肽(GSH)含量,谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)活力,抗羥自由基能力(anti-OH.)和抗超氧陰離子(anti-O2·)能力以進(jìn)一步評(píng)估肝臟的抗氧化能力。
結(jié)果:
1、體重及肝體比結(jié)果:低劑量飲酒后,各組SD大鼠的體重均比同周期的對(duì)照組體重要低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;低劑量飲酒組大鼠肝臟與對(duì)照組相比無(wú)顯著性差異;低劑量飲酒組大鼠肝/體比顯著大于同周期的對(duì)照組大鼠。
2、血
4、漿生化指標(biāo)ALT,AST,GT,TBIL的檢測(cè)結(jié)果:各個(gè)飲酒周期的對(duì)照組和飲酒組大鼠血漿中的ALT,AST,GT活性均無(wú)顯著性差異,而TBIL含量在飲酒12w后要低于對(duì)照組。
3、臟器中的核酸氧化結(jié)果:低劑量飲酒后,肝臟中的8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn的水平均比對(duì)照組顯著下降,心和腎中的8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn在飲酒4w,8w時(shí)與對(duì)照組相比并無(wú)顯著性差異,而在飲酒12w后核酸氧化分別出現(xiàn)下降和上
5、升趨勢(shì),其他臟器像睪丸,附睪,腦,胰腺其核酸氧化程度與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異。
4、肝臟中的抗氧化物質(zhì)和清除自由基能力檢測(cè)結(jié)果:低劑量飲酒4w、8w、12w后的大鼠肝組織,其anti-OH·能力,anti-O2·能力,GSH-PX活性均增強(qiáng),與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,GSH含量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異。
5、血漿和尿液中的核酸氧化結(jié)果:(1)低劑量飲酒后,各個(gè)周期的大鼠血漿和尿液中的8-oxo-dGs
6、n和8-oxo-Gsn均有上升的趨勢(shì),但是尿中的8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn增加的趨勢(shì)更加顯著,其8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn數(shù)據(jù)在飲酒4w后與對(duì)照組相比就有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,而血漿中的8-oxo-dGsn和8-oxo-Gsn數(shù)據(jù)直到飲酒12w后才有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;(2)無(wú)論是血漿還是尿液,其中的8-oxo-Gsn的含量均顯著高于8-oxo-dGsn;(3)尿液中的氧化鳥苷遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于血漿中的。
結(jié)論:
7、 ①低劑量飲酒后,大鼠不同臟器的核酸氧化程度不同,主要體現(xiàn)為肝臟中的8-oxo-dGsn,8-oxo-Gsn水平比對(duì)照組顯著下降,這可能與肝臟中的GSH-PX活性,anti-OH·能力,anti-O2·能力增強(qiáng)有關(guān)。
②低劑量飲酒后,血漿與尿液的核酸氧化均有不同程度的增高,特別是尿液中的氧化的核酸,來(lái)源于細(xì)胞DNA中降解的8-oxo-dGsn和RNA中降解的8-oxo-Gsn,代表著機(jī)體核酸氧化的總體水平,表明小劑量飲
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