縫隙連接蛋白43與大鼠脊髓損傷的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：本實驗通過建立大鼠脊髓損傷的動物模型，通過行為學觀察及Cx43、GFAP mRNA和蛋白的表達變化，初步探討縫隙連接蛋白43對脊髓損傷關(guān)系，進一步了解脊髓損傷的病理過程及為臨床治療提供實驗室依據(jù)。
　　方法：選擇36只雌性成年SD大鼠隨機分成兩組：假手術(shù)組（n=6）、脊髓損傷模型組（n=30,根據(jù)不同時相點隨機分成5個小組，每組6只）。假手術(shù)組只打開椎板暴露脊髓，不損傷脊髓；脊髓損傷模型組，用改良Allen法建立大鼠T10脊

2、髓損傷模型，在每一組動物傷后6h、12h、1d、3d、7d 5個時相點分別進行脊髓功能BBB評分，取損傷處脊髓組織用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）和western-blot法檢測縫隙連接蛋白43（Connexin43,Cx43）、膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）的表達變化，并進行單因素方差分析。
　　結(jié)果：（1）BBB評分結(jié)果：BBB評分結(jié)果：假手術(shù)組（只打開椎板暴

3、露脊髓，不損傷脊髓），脊髓神經(jīng)功能正常，雙人雙盲法BBB評分高達20分；脊髓損傷模型組，BBB評分隨時間增加而逐漸增大，脊髓損傷組各時相點與假手術(shù)組比較P＜0.01。
　　(2)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法（RT-PCR）結(jié)果：CX-43mRNA在脊髓損傷第1天就有上升，第3天達高峰，然后逐漸下降，但仍比正常要高，GFAP脊髓損傷后逐漸增高，隨著脊髓損傷后時間點逐漸增高，術(shù)后第7天仍然逐漸升高,假手術(shù)組與各時相點有統(tǒng)計學意義（P＜0.05