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文檔簡(jiǎn)介
1、【目的】
觀察并分析大鼠急性脊髓損傷后microRNA-223和RhoB基因表達(dá)變化及二者間的關(guān)系,探索治療脊髓損傷潛在的靶點(diǎn),提供理論基礎(chǔ)。
【方法】
采用改良Allen,s法建立大鼠急性脊髓損傷模型;將108只大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(A組、對(duì)照組,18只)、脊髓損傷組(B組、實(shí)驗(yàn)組),其中 B組分為SCI后6h、12h、24h、3d、7d組,每組各18只;各組分別于相應(yīng)時(shí)相行BBB評(píng)分評(píng)價(jià)神經(jīng)功能、HE染
2、色觀察組織形態(tài)學(xué)變化、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR檢測(cè)miRNA-223和RhoB基因表達(dá)、原位雜交檢測(cè)miRNA-223和RhoB表達(dá)的定位關(guān)系。【結(jié)果】
1、BBB評(píng)分:SCI后各時(shí)間組較無(wú)損傷對(duì)照組評(píng)分明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2、HE染色:正常脊髓組織神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)正常;損傷后6h組脊髓組織廣泛出現(xiàn)水腫;12-24h后發(fā)展為壞死組織,灰質(zhì)出現(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn);損傷后24h-7d,毛細(xì)血管通透性增加,組織液滲出,
3、神經(jīng)元細(xì)胞廣泛溶解、壞死,大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR:SCI后各實(shí)驗(yàn)組的脊髓組織中miRNA-223表達(dá)均升高,與無(wú)損傷對(duì)照組相比,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);SCI后各組RhoB表達(dá)逐漸增高,24h時(shí)達(dá)到高峰,隨之下降,至7d時(shí)表達(dá)仍高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。急性脊髓損傷后miRNA-223、RhoB兩種基因的表達(dá)呈顯著正相關(guān)(r=0.89)。
4、原位雜交:miRNA-
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